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- 翌圣生物（Yeasen）
- 上海
- 11810ES80
- 2025年10月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃保存
- 保质期：
有效期半年
- 英文名：
XL10-Gold Chemically Competent Cell
- 库存：
大量
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格：
100 μl×10管
XL10-Gold化学感受态细胞
产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格（元） |
| XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化学感受态细胞 | 11810ES80 | 100 μl×10管 | -80℃ | 287 |
XL10-Gold化学感受态细胞是经特殊工艺处理得到的感受态细胞，特别适合于大分子量DNA的高效转化。具有四环素和氯霉素抗性，使用Puc19质粒测得其转化效率达108cfu/μg，主要具有如下特点：
① Hte表型可增强较大分子量质粒和连接产物的高效转化；
② 具有限制性内切酶缺陷性，更利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取；
③ 更适于质粒文库的构建；
④ 具有lacIqZΔM15，可用于蓝、白斑筛选。
本品基因型：
TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F´proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]。
产品组分
| 编号 | 组分 | 规格 | 保存温度 |
| 11810-A | XL10-Gold化学感受态细胞 | 100 μl × 10 | -80℃ |
| 11810-B | pUC19（10pg/μl） | 10 μl × 1 | -20℃ |
干冰运输。
XL10-Gold化学感受态细胞-80℃保存，pUC19质粒-20℃保存。有效期半年。不能保存于液氮！
注意事项
1）感受态细胞应保存在-80℃，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2）整个转化操作，严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3）为确保最高转化效率，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温，且每次转化感受态使用量，不低于100μl。
4）为防止转化不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，最低化实验可能遇到的风险。
使用方法
1）取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2）向100μl感受态细胞悬液中加入0.1-50ng（＜10μl /100μl感受态）目的DNA或2μl连接产物，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30min。
3）置于42℃水浴中热激30s，然后快速将管转移到冰浴中，冷却2-3min，该过程不要摇动离心管，否则会降低转化效率。
4）向离心管中加入900μl 42℃预热的无菌NZY+培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床振荡培养1h（225-250rpm），目的是促使菌体复苏。
【注】：此步也可用LB培养基（不含抗生素）进行菌体复苏。
5）取上述≤200μl转化产物涂至含有相应抗生素的LB固体平板上，将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
【注】：如需做蓝白斑筛选，需至少孵育17h，以充分显色。
附录一：常用抗生素工作浓度
| 抗生素 | 翊圣货号 | 常用工作浓度 |
| Ampicillin 氨苄青霉素 | 60203ES10 | 100 μg/ml |
| Carbenicillin羧苄青霉素 | 60202ES08 | 100 μg/ml |
| Chloramphenicol 氯霉素 | 60205ES10 | 33 μg/ml |
| Kanamycin 卡那霉素 | 60206ES10 | 30 μg/ml |
| Streptomycin 链霉亲和素 | 60211ES60 | 25 μg/ml |
| Tetracycline 四环素 | 60212ES25 | 15 μg/ml |
附录二 NZY+培养基配方
10 g of NZ amine (casein hydrolysate)
5 g of yeast extract
5 g of NaCl
Add deionized H2O to a final volume of 1 liter
Adjust to pH 7.5 using NaOH and then autoclave
Add the following filer-sterilized supplements prior to use:
12.5 ml of 1 M MgCl2
12.5 ml of 1 M MgSO4
20 ml of 20% (w/v) glucose (or 10 ml of 2 M glucose)
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