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- 翌圣生物（Yeasen）
- 11804ES
- 上海
- 2025年12月27日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
BL21(DE3) Chemically Competent Cell
- 保质期：
有效期6个月
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件：
-80℃保存
- 规格：
10×100μl(11804ES80)
本品是在大肠杆菌 BL21（DE3）菌株基础上制备的化学转化感受态细胞，是以 T7 RNA 聚合酶为表达系统的高效蛋白表达宿主。可同时表达T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶，用于 pET 系列，pGEX，pMAL 等质粒的蛋白表达。适合于非病毒蛋白重组表达。使用pUC19检测转化效率达107 cfu/μg DNA 以上。
BL21 (DE3)感受态细胞基因型：F-ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm (DE3)。
产品组分
| 编号 | 组分 | 11804ES80 |
| 11804-A | BL21 (DE3)化学感受态细胞 | 10×100 μL |
| 11804-B | pUC19 (control vector, 10 pg/μL) | 10 μL |
运输与保存方法
干冰运输；-80℃保存，有效期6个月。请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。
注意事项
1. 本产品应保存在-80℃，不可反复冻融，以免降低感受态细胞的转化效率。
2. 本产品在冰中解冻时间不宜过长，感受态细胞刚化冻时转化效率最高。
3. 混入质粒时应轻柔操作。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
5. 本产品仅作科研用途！
使用方法
取100 μL感受态细胞，冰浴、解冻（大约5 min）。
2. 立即向解冻后的感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻弹匀，冰浴静置25 min。
【注】：所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
3. 42℃水浴中热激45 sec，然后快速将EP管转移到冰上，静置2 min。
【注】：此过程不要晃动，否则会降低转化效率。
4. 向离心管中加入700 μL左右不含抗生素的LB或2YT培养基，混匀后37℃，200 rpm复苏60 min。
5. 5000 rpm离心1 min收集菌体，留取100 μL左右上清涂布至含有相应抗生素的培养板上，37℃培养过夜。
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HB210720
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文献和实验[1] Zeng Z, Chen Y, Pinilla-Redondo R, et al. A short prokaryotic Argonaute activates membrane effector to confer antiviral defense. Cell Host Microbe. 2022;30(7):930-943.e6. doi:10.1016/j.chom.2022.04.015(IF:21.023)
[2] Tan FQ, Wang W, Li J, et al. A coiled-coil protein associates Polycomb Repressive Complex 2 with KNOX/BELL transcription factors to maintain silencing of cell differentiation-promoting genes in the shoot apex [published online ahead of print, 2022 May 4]. Plant Cell. 2022;koac133. doi:10.1093/plcell/koac133(IF:11.277)
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TOP10 chemically competent cells
Overview This protocol is a variant of the Hanahan protocol [1] using CCMB80 buffer for DH10B, TOP10 and MachI strains. It builds on Example 2 of the Bloom05 patent as well. This protocol has been tested on TOP10, MachI and BL21(DE3) cells
(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1 2：BL21(DE3) 菌株 该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3
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