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TOP10化学感受态细胞

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  • 百奥莱博
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  • 2025年07月16日
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    • 英文名

      TOP10?Chemically Competent Cell

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -80℃

    • 规格

      20×100μl/100×100μl

    特别提示:包括TOP10化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:TOP10化学感受态细胞
    英文名称:TOP10?Chemically Competent Cell
    产品货号:MQ0002
    产品规格:20×100μl/100×100μl

    TOP10菌株来源于MC1061菌株,是目前实验室zuì常用的感受态细胞之一,基因型与DH10B高度类似(DH10B为galE15型,而TOP10为galU型)。
    TOP10生长速度快(比DH5α快,但比Mach1-T1生长速度慢),10小时可见克隆,recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
    可用于构建克隆,蓝白斑筛选等实验,具有链霉素抗性。TOP10感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率>108cfu/μg。
    保存条件:-80℃
    基因型:
    F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80 lacZΔM15Δ lacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(StrR)endA1 nupG
    操作说明:
    1.TOP10感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。
    2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
    3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
    4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
    5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少13h。
    注意事项:
    1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
    2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
    3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少zuì终用于涂板的菌量。

    除了TOP10化学感受态细胞,,我公司还供应以下相关产品:


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    • 酵母质粒抽提方法

      4℃,14000r/m离心10min。  7.12 弃上清,空气中干燥。  7.13 10μl H2O悬浮细胞。8、转化(要求:4℃预冷)  8.1 冰上融化感受态细胞感受态细胞的制备见分子克隆啦)Top10f’。  8.2 加100μl转化细胞到预冷的1.5ml离心管中,枪头轻轻吹打混匀。  8.3 冰上孵育30min。  8.4 42℃,45S~50S。  8.5 冰上孵育2min后,加1ml LB。  8.6 37℃,1h,250r/m.  8.7 2500r/m

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