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- 2025年12月23日
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PCR定点突变和基因定点突变
- 提供商：
富衡生物
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PCR定点突变和基因定点突变
PCR定点突变是指利用重叠延伸PCR方法在目的基因中引入单个或多个碱基的突变，包括碱基的添加，删除，替换等。从而对改变的目的蛋白进行形状和表型的研究。 长片段基因定点突变是指利用一对完全互补的突变引物，以克隆在载体上的基因为模板，在高保真Pfu酶作用下完成对载体的突变，再利用DpnI酶特异性酶解未发生突变的原始单链。将消化后的单链载体转化到感受态细胞中，利用载体菌的自身互补系统将另一条链进行互补，最终形成完整的含有突变位点的载体。 一、服务内容 1. 基因编码区，非编码区的单位点和多位点突变； 2. 大片段基因的单位点和多位点突变； 3. 含高GC含量和重复序列基因或大片段的单位点和多位点突变。 二、收费标准
三、样品要求 1. 请提供待突变的质粒(> 1μg)或相应菌液； 2. 待突变的野生型基因或片段测序图谱一份； 3. 待突变位点的具体单位点和多位点要求； 4. 若无野生型的质粒或模板，也可提供基因组DNA(> 1μg)或RNA，由我们完成野生型基因或片段的构建，具体收费标准和实验周期请参考载体构建相关内容。 三、终产品 1. 完整实验报告 2. 突变完成的质粒和甘油菌株 3. 完整测序报告和序列碱基图 ◆载体改造 载体改造是指利用重叠延伸PCR、酶切等方法对己有载体多克隆位点(MCS) 序列、启动子、增强子、筛选标记、荧光标记等功能元件进行改造，从而增强载体的表达能力或形成具有新功能的载体。 一、服务内容 1. 提供改构成功的载体及甘油菌，提供改构后载体的测序报告； 2. 若改构位点特殊或较复杂，本公司技术部将免费为客户设计改构方案； 3. 各类载体改造，如细菌表达载体、酵母表达载体、杆状病毒表达载体、哺乳动物表达载体、报告基因载体等； 4. 若改构位点特殊或较复杂，本公司技术部将免费为客户设计改构方案。 二、收费标准
三、样品要求 1. 请提供待突变的质粒(> 1μg)或相应菌液； 2. 载体构建及改造所需的实验方案（包括序列资料、希望克隆到的载体、酶切位点等资料），目的基因产物及序列，待改造载体及相关背景资料。 3. 待突变的野生型基因或片段测序图谱一份； 4. 若无野生型的质粒或模板，也可提供基因组DNA(> 1μg)或RNA，由我们完成野生型基因或片段的构建，具体收费标准和实验周期请参考载体构建相关内容； 5.对于本公司已有的载体和模版，免费提供。 三、终产品 1. 完整实验报告（包括引物序列、载体图谱一份、测序结果等） 2. 含目的片段的质粒和含该质粒的甘油菌株 3. 完整测序报告和序列碱基图 ◆ 3’和5’RACE (rapid-amplification of cDNA ends) RACE是基于PCR技术基础上由已知的一段cDNA片段，通过往两端延伸扩增从而获得完整的3'端和5'端的方法。 一、服务内容 1. 3’和5’RACE特异性引物的设计； 2. 样品RNA的提取； 3. 序列未知基因3’和5’端片段的扩增； 4. 扩增片段的测序和比对； 5. 完整基因序列的拼接。 二、收费标准
三、样品要求 1. 待核酸提取的样品（包括细胞，组织，植物等） 2. 核心片段序列信息和预估计的基因长度，GC含量等相关信息； 四、终产品 1. 完整实验报告 (包括具体实验步骤和实验图片等) 2. 完整基因序列的质粒和克隆载体甘油菌株 3. 完整测序报告和序列碱基图 |
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文献和实验为了研究某一基因的功能，我们通常不仅需要研究其野生型基因的功能，也需要进一步去挖掘它发挥作用时是哪一个结构域，甚至是哪一个氨基酸发挥了作用，而这里面就涉及到了如何设计定点突变引物的问题。今天为大家介绍一个在线网址—quickchange primer design，可以非常方便快捷为我们设计出合适的引物。网站链接：https://www.agilent.com/store/primerDesignProgram.jsp 该网站可以设计单点和多点突变引物以及删除或者插入一段 DNA 序列（插入
木瓜奶茶 请问基因定点突变能一次性突变两个基因吗？我准备把GAC突变成CAG。还是得一个一个地突变？ zhujoker 单个可以，一起也可以的 木瓜奶茶 谢谢啊！ ziyikeer 你是用试剂盒还是自己做啊？推荐一个试剂盒给你Easy Mutagenesis system。不过你要设计好引物，引物设计可以自己看说明书。 本文由丁香园论坛
名为glgC336。经I2-KI染色法鉴定，突变基因的表达可提高细菌中的糖原含量。关键词：AGPase; E.coli ; PCR；glgC基因；序列分析；定点突变Cloning And Site-directed Mutagenesis of glgC Gene From E.coli Y1090Dong Yunzhou Wang Xiaofeng Jia Shirong（Biotechnology Research Center, Chinese Academy of Agricultural
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