microRNA实验85折促销(microRNA靶基因验证,定量PCR,microRNA-Seq,microRNA靶基因分析)

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定量PCR,microRNA-Seq,microRNA靶基因分析)
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  • 上海
  • 2025年12月26日
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      microRNA实验开学促销(microRNA报告基因实验,定量PCR,microRNA-Seq,microRNA靶基因分析)

    • 提供商

      英拜

    做microRNA报告基因实验免费赠送生物信息学服务!

    microRNA定量PCR 40元/孔!
    microRNA-Seq 4500元/样本(10M reads)!


    英拜生物可为您提供microRNA生物信息学分析到报告基因载体构建、检测服务整套服务,可加速科研人员对microRNA的功能研究。深入的生物信息学分析不仅可以为microRNA功能研究指引方向,也是解析microRNA调控网络的必备利器。
    本公司采用 的psiCHECK-2报告基因载体,具有多克隆位点,方便插入目的靶点序列,用于终点法的细胞裂解物检测,包含萤火虫荧光素酶基因,使海肾荧光素酶的表达水平归一化,所以无须通过共转染进行归一化,令该系统更可靠、重现性更好。本公司专业技术服务人员就可替您完成载体构建,为您节省大量的时间和精力。


    英拜生物microRNA报告基因实验流程:
    1.microRNA靶点的预测
    利用Targetscan,miRanda,Microcosm,Pita等软件得到目的microRNA的预测靶点序列(客户提供或由我公司预测)。
    2.获得microRNA靶点序列
    根据提供的靶序列,合成两条互补的单链DNA模板。或者,设计引物PCR扩增目的microRNA靶基因3’UTR序列。
    3.microRNA靶序列克隆
    将合成的两条单链退火成双链(具有粘性末端),或将PCR产物双酶切,后连入经过同样双酶切的psicheck报告基因载体中,连接产物转化大肠杆菌DH5α。
    4.阳性克隆鉴定。
    挑选转化的菌落,双酶切鉴定阳性克隆,并测序验证克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
    5.细胞转染准备
    将含目的microRNA靶基因的psicheck报告基因载体和microRNA mimics或microRNA negative control共转染293T或Hela细胞。
    6.荧光素酶检测
    共转染细胞24-72h后,进行双荧光素酶检测。
    7.整理分析数据,得出结论。
    提供有microRNA靶序列的报告质粒一份,甘油保存菌株各一支。附实验报告,包括载体构建过程,鉴定记录,测序报告,细胞转染,荧光检测。


    在本公司做microRNA靶基因报告基因实验,可以享受a-f中一项免费生物信息学服务:

    a)差异表达microRNA的筛选和聚类分析
    b)microRNA靶基因预测
    c)microRNA与靶标基因的调控网络构建
    d)microRNA与编码蛋白基因共转录预测
    e)microRNA与GO的调控网络构建
    f)microRNA与KEGG Pathway的调控网络构建
    g)microRNA甲基化位点预测
    h)microRNA转录因子结合位点预测
    i)microRNA与转录因子相互调控网络构建
    j)转录因子与microRNA靶标基因调控网络构建
    k)microRNA 、转录因子与靶标基因三者复杂调控网络构建

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