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- 2025年12月23日
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- 技术资料
- 服务名称：
载体构建
- 提供商：
富衡生物
载体构建
一、服务内容
1、以基因组DNA，cDNA，质粒，PCR产物等为模板扩增目的基因
2、将目的基因连接至克隆载体上并测序
3、将目的基因连接至表达载体上并测序
4、表达载体的小试表达验证
5、表达产物SDS—PAGE或者WB鉴定（目前暂无其它鉴定）
6、Western blot检测转染质粒的表达情况
7、表达蛋白体内和体外功能研究
二、样品要求（样品处理及保存见附件）
1. 基因组DNA或cDNA＞1ug；质粒＞100 ng；PCR产物＞100ug；
2. 也可提供细胞，组织，植物，血清等样品由我们进行核酸提取，具体样品要求详见荧光定量PCR服务项目；
三、收费标准
真核荧光蛋白表达载体构建
其它载体构建
四、客户提供材料
1、细菌（无致病性）、细胞、植物、土壤等核酸提取的样品；
2、质粒、cDNA或基因组DNA等；
五、提交给客户结果
1、克隆、表达质粒和含有质粒的甘油菌；
2、完整测序结果和碱基序列图；
3、完整实验报告。
一、服务内容
1、以基因组DNA，cDNA，质粒，PCR产物等为模板扩增目的基因
2、将目的基因连接至克隆载体上并测序
3、将目的基因连接至表达载体上并测序
4、表达载体的小试表达验证
5、表达产物SDS—PAGE或者WB鉴定（目前暂无其它鉴定）
6、Western blot检测转染质粒的表达情况
7、表达蛋白体内和体外功能研究
二、样品要求（样品处理及保存见附件）
1. 基因组DNA或cDNA＞1ug；质粒＞100 ng；PCR产物＞100ug；
2. 也可提供细胞，组织，植物，血清等样品由我们进行核酸提取，具体样品要求详见荧光定量PCR服务项目；
三、收费标准
| 服务项目 | 碱基数 | 收费标准￥ | 实验周期 | |
| PCR和克隆载体构建 | <1000 bp | 2000/基因 | 2-3周 | |
| 1000-2000 bp | 2500/基因 | 2-3周 | ||
| 2000-2500 bp | 3000/基因 | 2-3周 | ||
| 2500-3000 bp | 3500/基因 | 2-3周 | ||
| >3000 bp | 请询价 | 3-4周 | ||
| PCR和表达载体构建 | <1000 bp | 2000/基因 | 2-3周 | |
| 1000-2000 bp | 2500/基因 | 2-3周 | ||
| 2000-2500 bp | 3000/基因 | 2-3周 | ||
| 2500-3000 bp | 3500/基因 | 2-3周 | ||
| >3000 bp | 请询价 | 3-4周 | ||
真核荧光蛋白表达载体构建
| 服务项目 | 碱基数 | 收费标准￥ | 实验周期 | |
| 绿色荧光蛋白表达载体构建 Enhanced Green Fluorescent Protein (GFP) |
<1000 bp |
5000/基因 |
2-3周 |
|
| 红色荧光蛋白表达载体构建 Enhanced Red Fluorescent Protein (RFP) |
||||
| 1000-2000 bp |
5000/基因 |
2-3周 |
||
| 蓝色荧光蛋白表达载体构建 Enhanced Blue Fluorescent Protein (EBFP) |
||||
| 2000-2500 bp | 5000/基因 | 2-3周 | ||
| mCherry荧光蛋白表达载体构建 | ||||
| mStrawberry荧光蛋白表达载体构建 | ||||
| 2500-3000 bp | 5500/基因 | 2-3周 | ||
| mOrange荧光蛋白表达载体构建 | ||||
| AmCyan荧光蛋白表达载体 | ||||
| 黄色荧光蛋白表达载体 Enhanced Yellow Fluorescent Protein (YFP) |
||||
| >3000 bp | 请询价 | 3-4周 | ||
| 双荧光蛋白表达载体构建 | 请询价 | 4周 | ||
其它载体构建
| 服务项目 | 碱基数 | 收费标准￥ | 实验周期 | |
| 小RNA载体构建 | 3000/microRNA | 3-4周 | ||
| shRNA载体构建 | 2500/shRNA | 3-4周 | ||
| 荧光素酶报告基因载体构建 | <1000 bp | 3000/启动子 | 3-4周 | |
| 非编码区载体构建 | <1000 bp | 3000/UTR | 3-4周 | |
| 分泌表达型载体构建 | <1500 bp | 3000/基因 | 3-4周 | |
| 抗体表达载体构建 | 4500/抗体 | 3-4周 | ||
| 穿梭载体构建 | 3500/基因 | 3-4周 | ||
四、客户提供材料
1、细菌（无致病性）、细胞、植物、土壤等核酸提取的样品；
2、质粒、cDNA或基因组DNA等；
五、提交给客户结果
1、克隆、表达质粒和含有质粒的甘油菌；
2、完整测序结果和碱基序列图；
3、完整实验报告。
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文献和实验相关实验
1、载体基本介绍 2、载体分类及应用 3、载体构建及应用注意事项
慢病毒载体构建.pdf
在丁香园见过很多大佬分享载体构建经验，所以我这里写的T载体构建只能算是入门级，给新手提供一点思路，有什么不足之处还希望大家多多指正。 我克隆的这个片段大小是1.8kb，用的是TaKaRa的LA-Taq酶做的PCR。 反应体系：5*buffer 5 ul MgCl2 5 ul dNTPs 8 ul Primer 1 1 ul Primer 2 1 ul LA-Taq 0.5 ul cDNA 1 ul (1ug左右基因组DNA） ddH2O up to 50 ul
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