α1-2,3甘露糖苷酶 (α1-2,3 Mannosidase)

α1-2,3甘露糖苷酶 (α1-2,3 Mannosidas

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    概述
    α1-2,3甘露糖苷酶是一种高特异性的糖苷外切酶,催化寡糖 α1-2 和 α1-3-D-吡喃甘露糖残基水解(1)。


    特异性
    催化特异性随温育时间和分支结构的不同而改变。


    来源
    基因克隆自木薯细菌性枯萎病菌(Xan -thomonas manihotis ),在 E.coli 中表达(2)。


    反应条件
    1X G6 反应缓冲液 + BSA [50 mM 柠檬酸钠(pH 5.5 @25 ℃),5 mM CaCl2 ],添加 100 μg/ml BSA,37 ℃ 温育。


    随酶提供的试剂
    10X G6 反应缓冲液
    100X BSA


    比活性
    ~50,000 units/mg。


    分子量
    90 kDa。


    品质保证
    无外切糖苷酶污染,无蛋白水解活性。


    单位定义
    1 单位指 10 μl 反应体系中,37 ℃ 条件下,1 小时内将 1 nmol Manα1-3 Manβ1-4GlcNAc-AMC 中超过 95% 的末端 α-D-甘露糖水解所需的酶量。


    浓度
    32,000 units/ml。


    贮存条件
    50 mM NaCl,20 mM Tris-HCl(pH7.5 @ 25 ℃),1 mM Na2 EDTA。4 ℃保存或分装后于-20 ℃ 保存。避免反复冻融。


    热失活
    55 ℃ 10 分钟。


    注意
    对硝基苯-α-D-吡喃甘露糖不是本酶的底物。


    参考文献
    (1) Wong-Madden, S.T. and Landry,D. (1995) Glycobiology , 5, 19–28.
    (2) Guthrie, E.P., Shimer, E.P., New EnglandBiolabs, Inc., unpublished results.


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