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Phototope-Star检测试剂盒

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  • N7020
  • 2026年06月03日
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    单独出售的成分：
    CDP-Star试剂
    #N7001S      2.5 ml     ¥ 4,449.00

    CDP-Star (25X)检测缓冲液
    #N7011S    25.0 ml        ¥ 129.00

    链霉亲和素
    #N7021S     1.0 mg       ¥ 679.00

    生物素标记碱性磷酸酶
    #N7022S      0.5mg       ¥ 639.00
    概述
    Phototope-Star 检测试剂盒使用生物素与目的DNA交联，以此对DNA 进行化学发光法检测(图1)。生物素的掺入是通过使用生物素标记的引物或生物素标记的三磷酸核苷酸(NEBlot Phototope Kit, NEB #N7550S) 进行DNA合成来完成。
    生物素标记的DNA在膜上进行检测。首先将膜暴露于链霉亲和素中，链霉亲和素与生物素标记的DNA结合。然后，加入生物素标记的碱性磷酸酶，可与链霉亲和素结合。因此，碱性磷酸酶和膜上的DNA结合。最后，加入化学发光试剂 (CDP-Star)。碱性磷酸酶催化底物去磷酸化，能将1，2-二氧环已烷衍生物的替代物——苯|酚磷酸盐生成较为稳定的中间产物，当中间产物退变时会发光，用X-ray胶片对膜曝光2-10分钟即可检测发光情况。
     
    使用膜的注意事项
    使用 Phototope 试剂盒时需要将凝胶中的 DNA 转移至固相膜上。试剂盒是根据 Millipore 公司的 Immobilon-S 膜研发的；但是其它中性或带有弱阳性的尼龙膜也可作为替代品，而使用硝化纤维不能得到理想结果。
    Phototope-Star 试剂盒的组成
    • 链霉亲和素 
    • 生物素标记碱性磷酸酶 
    • CDP-Star试剂 
    • CDP-Star(25X)检测缓冲液  
    Phototope- Star 检测试剂盒的优点
    • 稳定性：
      生物素标记的探针和试剂可长期稳定贮存于 –20 ℃。
    • 速度：
      整个检测程序在 1 小时内完成。曝光时间一般仅需 15 秒至 15 分钟。
    • 探针重复使用：
      杂交缓冲液中的探针，可保存于 –20 ℃，以便重复使用。
    • 多次曝光：
      光保持在一个恒定速率，在长时间内散发，所以可以做多次曝光从而得到最佳信号强度。再次暴光只需要重新加入 CDP-Star 试剂。
    • 易于再次杂交：
      同一张膜可以在洗膜后，加入探针再次杂交。
    • 无放射性
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
     
    化学发光检测原理

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