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Tth RecA蛋白

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      有
    ♦ 电镜分析 DNA 结构（1）
    ♦ D 环突变（2，3）
    ♦ 用 RecA 蛋白包被的探针来进行文库筛选（4，5）
    ♦ DNA 靶位点的裂解（6）


    概述
    Tth RecA 蛋白分离自嗜热栖热菌（Thermus thermophilus ），是 RecA 蛋白的同源蛋白。在最适温度65–75°C范围内，Tth RecA 蛋白具有依赖于ssDNA 的 ATPase 活性。由于具有极高的热稳定性，对于需要高温反应条件的分子生物学技术，如核酸扩增和测序来说 ，Tth RecA蛋白是一个理想的选择。


    来源
    重组 E. coli 菌株。携带有从嗜热栖热菌（Thermus thermophilus ）克隆的 recA 基因。由 Biohelix 公司 (NEB合作公司) 研发。


    质保声明
    无核酸内、外切酶活性污染。每批次都检测了单链DNA依赖性ATPase活性，且经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示该酶纯度>95%。


    单位定义
    本品按纯蛋白含量销售。纯蛋白量在OD280 下测得(蛋白浓度为1 mg/ml时A280 值为：0.516；光程为1cm) 。


    浓度
    1 mg/ml。


    分子量
    36 kDa。


    贮存条件
    10 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25°C) ,100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1% TritonX-100 和50%甘油。-20°C贮存。


    使用注意
    Tth RecA 在任一聚合酶缓冲液中均有活性。每 50 μl 反应体系添加 400 ng 的 Tth RecA。


    参考文献
    (1) Wasserman, S.A. and Cozzarelli, N.R. (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 82, 1079–1083.
    (2) Biet, E. et al. (2001) Biochemistry , 40, 1779–1786.
    (3) Shortle, D. et al. (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77, 5375–5379.
    (4) Rigas, B. et al. (1986) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83, 9591–9595.
    (5) Honigberg, S.M. et al. (1986) Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 83, 9586–9590.
    (6) Koob, M. et al. (1992) Nucleic Acids Res ., 20, 5831–5836.


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