全自动加样系统造成ELISA实验拖带现象分析

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作者：李荣 作者单位：(广西玉林市中心血站，广西 玉林)

【摘要】 目的通过对血液标本使用全自动加样系统在酶联免疫吸附测定(ELISA)实验中出　　现的拖带现象进行分析，寻求有效的解决拖带现象的方法。方法用Freedom EVO Clinical和ML-STAR全自动加样系统加样，对ELISA实验出现拖带阳性的标本，采取手工加样用原试剂盒进行双孔复试，比较两种加样方法的检测结果。结果经手工加样ELISA双孔复检，结果均为阴性，证实为拖带阳性。结论拖带现象是由全自动加样系统加样针污染引起的，做好对仪器的维护保养可以减少拖带现象的发生，而最好、最根本的解决办法是使用一次性加样针。

【关键词】 全自动加样系统;酶联免疫吸附测定;拖带现象;设备污染

　全自动加样系统在血站的使用日趋普及，但目前使用的多为固定加样针，这样分配位置在前的样本会使其后的样本出现不同程度的污染，引起假阳性或假阴性，也就是通常所说的拖带现象。拖带现象会导致大量标本待检或试验重做，这样不但增加了工作量，浪费试剂，更为严重的是有可能导致阳性标本的漏检，影响检验质量。现将本站43 242份标本的检测情况作回顾性分析，以寻求有效的解决拖带现象的方法。

　　1材料与方法

　　1.1标本来源43 242份标本均为本站无偿献血者现场留样抗凝标本。

　　1.2拖带现象的识别通常做酶免实验的96孔微板8行以A～H标示、12列以1～12标示。根据全自动加样系统的分配规律，运行方向是以微板从左到右，即从第1列开始，每次加8孔。ML-STAR有三组钢针，每组8根针，通过循环轮换三组钢针模式实现样本的批处理;Freedom EVO Clinical 200只有一组8根钢针。如果阳性(特别是强阳性)标本后经同一根针所加标本出现一个或多个连续阳性，比如用ML-STAR加样，如果A1阳性，A4或后面每隔2孔也是阳性;若是用Freedom EVO Clinical 200加样，如果A1是阳性，A2或后面的板孔也是阳性，且越往后反应强度越弱则怀疑是拖带所致。

　　1.3仪器与试剂Freedom EVO Clinical 200全自动加样系统(瑞士TECAN)、ML-STAR全自动加样系统(瑞士HAMILTON);HBsAg试剂盒由厦门新创和北京万泰提供，抗-HCV试剂盒由北京万泰和北京金豪提供，抗-HIV试剂盒由珠海丽珠和北京金豪提供，TP抗体检测试剂盒由北京万泰和厦门新创提供。

　　1.4实验方法按照试剂说明书要求编制加样程序，初、复检四项的加样顺序为HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、TP，先加初检，后加复检，最后加对照。对疑似拖带现象导致假阳性的标本挑出原试管和小辫进行复检，经手工加样双孔复试为阴性则证实为拖带所致的假阳性。