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灵活多变的一体化超快速克隆试剂
企业认证
- 20℃保存
一年
ClonExpress Ultra One Step Cloning Kit
充足
南京诺唯赞生物科技有限公司
25 rxns/50 rxns
灵活多变的一体化快速克隆试剂盒
快速:5 - 15min快速重组
简单:一管式Mix,操作简便
高效:高效克隆50 bp~10 kb片段,阳性率>95%
兼容:单片段、多片段、入门克隆三合一
零背景:提供零背景、氨苄/卡那双抗性载体
提供在线引物设计:提供在线引物设计软件CE Design
1.高度简化的实验流程
通过PCR扩增,使插入片段5’和3’最末端分别带有和线性化载体两末端一致的序列(15 - 20 bp)。用2 × ClonExpress Mix,50℃反应5-15 min,进行重组。重组产物直接转化感受态细胞,平板上会形成数百个单克隆供阳性筛选。
2.优异的克隆效率
试剂盒能够高效克隆50 bp-10 kb片段,不同长度单片段50 bp、2 kb、4.5 kb、7.5 kb、10 kb;多片段:四个片段(3 kb)、三个片段(10 kb)、五个片段(3 kb)、五个片段(6 kb),纯化后分别与pCE-Zero vector进行同源重组,重组产物转化化学感受态细胞DH5α(Vazyme #C502),菌落数如下图所示。
试剂盒独特的非连接酶依赖体系,无载体自连,克隆阳性率高达95%以上。重组产物转化平板后,各挑取50个单克隆进行菌落PCR鉴定,不同长度插入片段阳性率如下图所示。
3.广泛的体系兼容性
试剂盒兼容1至5个片段同源重组,搭配Vazyme高保真酶,PCR产物可不经过纯化直接进行克隆。重组产物转化化学感受态细胞DH5α(Vazyme #C502),XL10(Vazyme #C503),Fast-T1(Vazyme #C505),得到较高克隆效率。
4.载体序列信息及测序方案
pCE-Zero vector载体,测序时使用通用测序引物(M13)即可。
ClonExpress Ultra One Step Cloning Kit是新一代的重组克隆试剂盒,可快速高效的将1-5个片段定向克隆至任意载体的任意位点,高度优化的2 × ClonExpress Mix,50℃反应5-15 min完成重组,操作简单快捷。
组分
C115-01(25 rxns)
C115-02(50 rxns)
2 × ClonExpress Mix
125 μl
2 × 125 μl
pCE-Zero vector,linearized (50 ng/μl) *
25 μl
50 μl
500bp control insert (20 ng/μl)
5 μl
*双抗性载体:Amp+,Kan+
- 20℃保存。
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