广谱核酸酶Binuclease®

广谱核酸酶Binuclease^®

 

 

 

产品简介：

广谱核酸酶Binuclease^®是经过蛋白质工程技术改造的源于粘质（Serratia marcescens，又称灵杆菌）的非特异性核酸内切酶。它由真核生物酵母表达纯化，不含有原核生物表达的细菌内毒素。在功能上，它能够降解各种形式DNA和RNA，无论是单链、双链、线状、环状或超螺旋形式的DNA和RNA，切断磷酸二酯键从而产生5’-磷酸核苷酸或5’-磷酸寡核苷酸。广谱核酸酶对核酸碱基序列无特异性要求，可在链内任意核苷酸间进行切割，可用于除去生物制品中的核酸。在疫苗工业、蛋白和多糖类制药工业中，广泛用于去除宿主核酸残留，可使疫苗和蛋白类产品核酸污染达到皮克（picogram, pg）级别。广谱核酸酶也可以作为培养细胞上清和细胞裂解液去粘度的选酶制剂。

 

货号：	BNL-50k
来源种属：	粘质氏菌（Serratia marcescens）
产品性状：	液体酶为无色透明液体（含甘油的缓冲液）；固体酶为白色冻干粉。
相对分子质量：	27.9 kD
纯度：	≥ 90%（超纯酶≥ 99%）（SDS-PAGE）；
酶活性值：	液体酶活性值≥250 U/μL；固体酶活性值≥2.0×105 U/mg冻干粉。
比活：	≥1.0×106 U/mg蛋白
蛋白酶：	≥1.0×106 U/mg蛋白
内毒素：	（鲎试剂法）未检出。
最适pH：	8.0（工作范围pH 6～10）
最适温度：	37ºC（工作范围0～42ºC）
辅助因子：	1～10 mM Mg2+
微生物指标：	液体酶经0.22 μm条件过滤除菌后，未检出微生物。固体酶溶解后如需储藏，建议过滤除菌后置于－20ºC保存。
保质期：	2年

 

 

       液体酶宜冷藏运输。建议－20ºC保存。

固体酶可室温运输。建议储存温度低于4ºC。

液体酶在－20ºC条件下，有效期为两年。打开包装使用后，如果在2～8ºC环境下放置超过一周时间，建议过滤除菌，防止微生物污染。固体酶储存有效期为2年，打开包装后及时使用，避免受潮。

        贮存缓冲液：20 mM Tris-Cl（pH 8.0），2 mM MgCl₂，2 mM NaCl，50%甘油。

稀释缓冲液：20 mM Tris-Cl（pH 8.0），2 mM MgCl₂，2 mM NaCl。

本品固体冻干粉酶可用上述溶液溶解后保存，或不加甘油直接使用。

 

活性测定及活性单位定义：

反应条件为50mM Tris-Cl（pH 8.0），含1 mM MgCl₂，100 µg/mL牛血清白蛋白，底物为经超声波处理的鲑鱼精DNA（1 mg/mL），高氯酸沉淀后测定上清溶液在260 nm波长下的光吸收值。在37ºC、pH 8.0的反应条件下，2.625 mL的反应体系中，30分钟内可将37 µg（相当于A₂₆₀＝1.0）的底物DNA（鲑鱼精DNA）消化成为寡核苷酸的Binuclease核酸酶的量，定义为一个活性单位（U）。

应用范围：

1、用于除去生物制品中的DNA/RNA

美国FDA对治疗用每剂量的生物制品的核酸含量要求为低于10 pg，国内对此相应的

要求为低于100 pg。广谱核酸酶可将核酸水解为3～5 bp的寡聚核苷酸，再经过色谱层析等方法纯化，使生物制品的最终核酸含量符合要求。

2、用于降低细胞破碎后的粘度

广谱核酸酶可以水解核酸，降低细胞溶解产物的粘度，从而提高蛋白质的产量，改善离心分离效果，使之易于过滤（尤其是超滤），增加层析纯化的效率。

3、用于细胞培养上清来源产物的纯化过程

核酸很容易粘附在病毒样颗粒（VLP）、病毒粒子、包涵体等细胞生成颗粒的表面，造成这些颗粒的聚集，使颗粒大小或电荷发生改变，从而影响分离提纯。广谱核酸酶可有效避免核酸的对纯化的影响，从而提高产量。

4、用于生化分析中样品的制备

在ELISA、色谱分析、双相电泳和足迹分析等过程中，用广谱核酸酶处理含有核酸的蛋白样品，可提高分辨率，并提高回收率。