Bst DNA 聚合酶, 大片段 Bst DNA Polymerase, Large Fragment

Bst DNA 聚合酶, 大片段 Bst DNA Polym

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  • M0275
  • 2025年07月31日
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      Bst DNA Polymerase, Large Fragment

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    #M0275L
    8,000 units
    2,789.00
    #M0275M
    8,000 units
    2,789.00
    #M0275S
    1,600 units
    629.00
    #M0275V
    800 units
    319.00
    概述
    Bst DNA聚合酶大片段是Bacillus stearothermophilusDNA聚合酶的一部分,具有3´DNA聚合酶活性,但不具有外切核酸酶活性。
    来源
    来源于 E.coli菌株,此菌株含有来自Bacillusstearothermophilus DNA 聚合酶的基因,该基因缺失了5' 3' 外切核酸酶结构域。应用基因重组技术,将麦芽糖结合蛋白(MBP)基因与该基因融合表达,融合蛋白经纯化后再在体外切除掉 MBP,纯化后的聚合酶不含 MBP1)。
    反应缓冲液
    1X ThermoPol Reaction Buffer
    [20 mM Tris-HCl (pH 8.8 @ 25°C), 10 mM KCl, 10 mM (NH4)2SO4, 2 mM MgSO4, 0.1% Triton X-100]
    单位定义
    1 单位指 65 条件下,30 分钟内使 10 nmol dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
    活性检测条件
    50 mM KCl, 20 mM Tris-HCl (pH 8.8),10 mM MgCl2, 30 nM M13mp18 ssDNA, 70 nM M13测序引物 (-47) 24 mer, 200 μM dATP, 200 μM dCTP,200 μM dGTP, 100 μM [3H] dTTP, 100 μg/ml BSA 和酶。65°C温育。
    浓度
    8,000 units/ml 120,000 units/ml
    贮存条件
    50 mM KCl, 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.1% Triton X-10050%甘油。贮存于-20°C
    热失活
    80°C 10分钟。
    注意事项
    Bst DNA 聚合酶不具有 3' 5' 外切酶活性。
    长期贮存需加入 100 μg/ml BSA 0.1% Triton X-100
    建议反应温度不要超过 70
    Bst DNA 聚合酶不能用于热循环测序或 PCR

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