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细胞MTT检测服务

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      细胞实验技术服务

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      上海达为科生物科技有限公司

    细胞MTT检测服务

    噻唑蓝(MTT):可用于检测细胞增殖,在传统方法中使用掺入放射性同位素作为测量细胞分裂的方法。MTT是一种浅黄色的溶液,通过活细胞的线粒体脱氢酶转换为不溶于水的深蓝色的MTT-甲瓒。蓝色的结晶溶解于酸化的异丙醇并在570nm的波长有最大吸收。 MTT法已被用来作为组织化学/细胞化学试剂。MTT能够迅速被还原成甲臜,能够螯合镍,铜,钴等,其中钴螯合物在氧化系统中使用。 MTT法已被用于检测NAD、 NADP-关联的酶系统。MTT像其它的四唑盐,已在很大程度上取代硝基氯化四氮唑蓝(NBT)。

    细胞MTT检测服务 主要有两个用途:

    1.药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定;

    2.细胞增殖及细胞活性测定。

    MTT原理:

    检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值,在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值(OD值),来判断活细胞数量,OD值越大,细胞活性越强(如果是测药物毒性,则表示药物毒性越小)。

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    • MTT检测细胞生长

      度 3 个重复孔。对照孔 6 个: 3 个阳性对照孔,每孔加 0.1ml 含大剂量细胞因子的 RPMI-1640 培养液, 3 个阴性对照孔,每孔加 0.1ml RPMI-1640 培养液。在 37 ℃ 5 % CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养 24 ~ 48 小时或预定的时间。 3. 吸去培养液,用 PBS 洗涤一次(如为悬浮细胞,应在吸去上清液前离心培养板)。 4. 每孔加 0.1ml PBS 和 10 μ l MTT 染液,在 37 ℃ 5 % CO2 的饱和

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