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- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8度
- 保质期:
现询客服
- 英文名:
RIPA buffer(high)
- 库存:
大量
- 供应商:
索莱宝
- 规格:
20ml/100ml
| 规格: | 20ml | 产品价格: | ¥120.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100ml | 产品价格: | ¥400.0 |
组成:SDS,NP-40,脱氧胆酸钠,偏钒酸钠,EDTA等.(配有一
支PMSF).
保存:4 ºC避光
货号:R0010
规格:20ml/100ml
本产品配有一支 PMSF(0.3ml/1.5ml)
保存:RIPA 裂解液 4℃保存,PMSF-20 ℃保存。
使用说明:
如发现 RIPA 有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。
根据使用量, 取每 1ml RIPA 加入 10ul PMSF, 使 PMSF 的最终浓度为 1mM。 混匀备用 (PMSF 现用现加) 。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入
150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250 ul 裂解
液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,
必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品:把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解
液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用
量) 。 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的 PAGE、Western 和免疫沉淀等操
作。
注意事项:
本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成
细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,
可入加少量 SDS(1%) ,煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适
合使用 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒,请选择 BCA 法或者 Lowry 法检测蛋白浓度。
如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清
用于后续实验。
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PC1100-5000Taq DNA Polymerase5000U
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参考文献:
《Liraglutide reduces hepatic glucolipotoxicity?induced liver cell apoptosis through NRF2 signaling in Zucker diabetic fatty rats》 作者:Jun Guo,Cai Li,Chunxiao Yang,Bing Li,Jie Wei,Yajun Lin,Peng Ye,Gang Hu,Jian Li 期刊:Molecular Medicine Reports 影响因子:1.851 PMID:29693190
《Gecko Active Components Regulates Endoplasmic Reticulum Stress to Induce the Apoptosis of KYSE150 Cells through PERK Pathway》 作者:Yimeng Duan, Lengxin Duan, Zeyue Huang, Bingbing Wang, Jiangang Wang 期刊:Journal of Biosciences and Life Sciences 影响因子:0.552 PMID:
《Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA‐593‐5p to modulate human glioma growth via polo‐like kinase 1》 作者:Ren Zhang, Ruo‐Lun Wei, Wei Du, Li‐Wei Zhang, Tao Du, Ya‐Dong Geng, Xin‐ting Wei 期刊:CNS Neuroscience & Therapeutics 影响因子:4.458 PMID:30924320
《Glutamine Enhances the Hypoglycemic Effect of Insulin in L6 Cells via Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3K)/Protein Kinase B (AKT)/Glucose Transporter 4 (GLUT4) Signaling Pathway》 作者:Caijuan Wang, Yujiao Deng, Yenan Yue, Wenting Chen, Yu Zhang, Guifang Shi, and Zhongming Wu 期刊:Medical Science Monitor 影响因子:1.98 PMID:29491345
《Sphingomyelin synthase 2 promotes H2O2-induced endothelial dysfunction by activating the Wnt/β-catenin signaling pathway》 作者:Panpan Zhang,Lingyue Hua,Huan Hou, Xingyue Du,Zhiqiang He, Menghan Liu, Xiaojuan Hu, Nianlong Yan 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影响因子:2.928 PMID:30272329
《Downregulation of transcription factor EB inhibits the growth and metastasis of colorectal carcinomas》 作者:Jin-Zhe Chang,Shu-Dong Chen,Hui Zheng,Hua-Ping Zhang 期刊:European Journal of Inflammation 影响因子:0.733 PMID:
《Stem cells from human exfoliated deciduous teeth ameliorate type II diabetic mellitus in Goto-Kakizaki rats》 作者:Nanquan Rao, Xiaotong Wang, Yue Zhai, Jingzhi Li, Jing Xie, Yuming Zhao and Lihong Ge 期刊:Diabetology & Metabolic Syndrome 影响因子:2.361 PMID:30858895
《Eicosapentaenoic acid-containing phosphatidylcholine promotes osteogenesis:mechanism of up-regulating Runx2 and ERK-mediated phosphorylation of PPARγ at serine 112》 作者:Lei Mao,Meiling Wang,Yuanyuan Li,Yaxuan Liu,Jingfeng Wang,Changhu Xue 期刊:Journal of Functional Foods 影响因子:3.197 PMID:
《Disparate expression of autophagy in corneas of C57BL/6 mice and BALB/c mice after Aspergillus fumigatus infection》 作者:Chen-Yu Li, Cui Li, Hui Li, Gui-Qiu Zhao, Jing Lin, Qian Wang, Xu-Dong Peng, Qiang Xu, Guo-Qiang Zhu, and Jia-Qian Jiang 期刊:International Journal of Ophthalmology 影响因子:1.189 PMID:31131226
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免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 注意:在准备做磷酸(酯)酶实验的时候,不加磷酸酯酶抑制剂。 一、工作液配制 配制 100 ml 的 modified RIPA buffe: 1.称取 790 mg 的 Tris-Base,加到 75 ml 去离子水中,加入 900 mg 的 NaCl,搅拌
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