
脉冲场电泳 PFGE
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- Rotaphor 6.0
- 2025年07月16日
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- 技术资料
- 英文名:
Rotaphor 6.0
- 供应商:
上海一贝科技有限公司
- 规格:
套
脉冲场电泳(PFGE,Pulsed Field Gel Electrophoresis)是一种分离大分子DNA的方法。基于这一技术Biometra开发出具有专利技术的旋转脉冲场电泳系统——Rotaphor 6.0系统。
Rotaphor 6.0的原理
Rotaphor 6.0采用专利的旋转脉冲场(ROFE,Rotating Filed Electrophoresis),如图1所示电极安置在转子上,由转子带动电极以任意角度旋转,产生均一的重复电场(如图2)。在脉冲场凝胶电泳中,电场不断在两种方向(有一定夹角,而不是相反的两个方向)变动。由于DNA分子带有负电荷,会朝正极移动。相对较小的分子在电场转换后可以较快转变移动方向,而较大的分子在凝胶中转向较为困难。因此小分子向前移动的速度比大分子快,最终达到分离的目的。
Rotaphor 6.0的特点
- 专利的旋转脉冲场,独特新颖的脉冲场设计,由转子带动电极以任意角度旋转,产生均一的重复电场;分离范围大,可分离长达8Mb的DNA片段;分辨率高,可轻易地分辨线性和环状的DNA,对大的环状DNA分离效果更佳;
- 功能灵活,可应用CHEF、FIGE、PAGE和ROFE等大分子DNA分离方法;
- 缓冲液控制系统,Rotaphor电泳池内置缓冲液循环泵与外部的制冷调节器相连,它通过软件精准控制和监测缓冲溶液的温度,保证电泳时恒定的温度和离子平衡
- 易于操控,独有的软件控制,操作简便,无限量内存空间,可建立自己的数据库;除了自定义程序外,软件自带17个分离各种片段范围的预设程序,并附实图参考
Rotaphor 6.0脉冲场电泳的应用领域
- 生物、微生物种系鉴定;分子流行病学的研究
- 基因组文库或大片段质粒的研究;疾病基因的定位
- 基因物理图谱绘制,RELP分析和DNA指纹图谱分析
- 程序性死亡研究,DNA的损伤和修复研究
- 自定义程序外,软件自带17个分离各种片段
Rotaphor 6.0的参数
凝胶室
- 由14个铂金电极组成的旋转电极可以自由旋转
- 角度设置范围:95-160度,步进值1度
- 内置的缓冲液循环泵
- 内部冷却回路,接于外置温度控制器
- 温度敏感探头
- 最多2.4L缓冲液
- 丙烯酸透明玻璃安全盖(当盖子抬起时自动切断电源)
- 尺寸:35 x 47 x 25 cm(W x D x H)
胶板
- 可调整水平的支角
- 20 x 20 cm凝胶尺寸
- 最大18cm电泳距离
- 18齿梳子,制胶厚度为5mm,最大上样品量60μl;可选25/40/50齿的梳子,18孔(用于液体样品)
- 制胶框
控制器
- 个人计算机,操作系统Win XP,256M内存,40G硬盘,40X光驱
- Rotaphor电泳槽控制界面
- 预装Rotaphor 6.0控制软件
Rotaphor 6.0控制软件
- 17组优化程序,可用于分离100bp-6,000kb的DNA样品
- 可根据分离样品类型将电泳程序分类
- 非常方便地调整各种参数(电极角度、电压、脉冲时间)
- 用于电泳的程序电压范围0-225V(0-8.5V/cm)
- 电泳缓冲液温度精确控制(5-22℃)
- 针对每一组电泳程序,都会有相应的实际电泳结果照片显示
- 用户分组和密码控制
- 全面的在线帮助
- 用户手册
电源
- 电压:0-300V
- 电流:0-450mA
- 尺寸:52mm x 222mm x 202mm(H x W x D)
- 重量:1.7 kg
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文献和实验脉冲场凝胶电泳(PFGE)的原理大致为:细菌包埋于琼脂块中,用适当的内切酶在原位对整个细菌染色体进行酶切,酶切片段在特定的电泳系统中通过电场方向不断交替变换及合适的脉冲时间等条件下而得到良好的分离。PFGE中内切酶的选用至关重要,所采用的内切酶常为寡切点酶(low frequency cleavagerestric-tionendoucleases),这种酶切后的片段少而大,适合于作PFGE电泳。McCllelland等通过对细菌的PFGE电泳图谱的内切酶的选择研究发现,四核苷酸CTAG
目的:运用PFGE方法对20Kb至数Mb的DNA进行分子分型背景知识:这个试验是公认的操作繁琐,至少要2天, 以下内容需要登录后才能完全查看,请您登录 马上登陆 | 企业会员注册
PFEG(Plused-Field Gel Electrophoresis)技术是将细菌完全包裹在一种特殊的琼脂中,然后加入一些化学试剂,比如十二烷基肌氨酸钠,蛋白酶K等,将细菌中的蛋白成分全部溶化,消化,只剩下整个序列的DNA。经稀有限制性内切酶消化后,切割成大小不等的片断,然后将其置于脉冲场电泳槽中电泳,完成片段分离的过程。经染色脱色后,在读胶仪上显现酶切后的电泳图谱,并经统计软件的分析,即可判断出条带的不同,同时做出细菌的同源性分析,从而达到分型的目的。其中能影响电泳图谱的参数
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