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- 详细信息
- 用户评价
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
1年
- 供应商：
万类生物
- 规格：
50T
万类生物试剂促销：试剂盒8折优惠，核蛋白和浆蛋白提取试剂盒-50T 原价399元，现价320元。
产品名称：核蛋白和浆蛋白提取试剂盒-50T（试用装10T）
产品概述：
核蛋白和浆蛋白提取试剂盒（Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit）提供了一种比较简单、方便的从细胞或组织中提取细胞核蛋白和浆蛋白的方法 , 约90min就可以完成细胞核蛋白与浆蛋白的分离。制备的核蛋白和浆蛋白能保持天然活性，且纯度较高 , 可用于 E 进一步的转录因子活性分析、酶活性测定等后续蛋白质研究。Western blot、co-IP、 MSA（也称gel shift）、footprinting进一步的转录因子活性分析、酶活性测定等后续蛋白质研究。
本试剂盒是通过细胞浆蛋白提取试剂A和B，在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀，然后破坏细胞膜，释放出细胞浆蛋白，然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的细胞核蛋白提取试剂C提取得到细胞核蛋白。
保存条件：
本试剂盒各试剂均于-20℃保存，自订购之日起一年内有效。
注意事项：
1. PMSF一定要在抽提试剂加入到样品中前2-3min内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
2. 抽提蛋白的所有步骤都需要在冰上或4 ℃进行。
3. 抽提到的核蛋白和浆蛋白均可直接用本公司生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒（WLA004）测定蛋白浓度 ，但不适合用Bradford法测定蛋白浓度。
该产品被引用文献（仅展示部分）：
1、Zhu Y; Chen S; Liu W, et al., IGF-1R/YAP signaling pathway is involved in collagen V-induced insulin biosynthesis and secretion in rat islet INS-1 cells. Connect Tissue Res 2022, 1-16.
PubMed: 35129018
2、Zhang J; Li Q; Sun Q, et al., Epigenetic modifications inhibit the expression of MARVELD1 and in turn tumorigenesis by regulating the Wnt/beta-catenin pathway in pan-cancer. J Cancer 2022, 13 (1), 225-242.
PubMed: 34976185
3、Liu W W; Wang F; Li C, et al., Silibinin relieves UVB-induced apoptosis of human skin cells by inhibiting the YAP-p73 pathway. Acta Pharmacol Sin 2021.
PubMed: 34912007
4、Li B; Wang Y; Zhao H, et al., Oxidative stress is involved in the activation of NF-kappaB signal pathway and immune inflammatory response in grass carp gill induced by cypermethrin and/or sulfamethoxazole. Environ Sci Pollut Res Int 2021.
PubMed: 34718981
5、Wu F; Huang Y; Wei G, et al., Exogenous Hsp70 attenuates nitroglycerin-induced migraine-like symptoms in mice. J Neurophysiol 2021, 126 (4), 1030-1037.
PubMed: 34469702
操作流程：
1. 室温溶解试剂盒中的三种试剂，溶解后立即放置在冰上。取适量的细胞浆蛋白抽提试剂A和细胞核蛋白抽提试剂C备用，在使用前数分钟内加入PMSF和DTT，使其终浓度均为1mM。
2. 贴壁细胞：取培养细胞2×106-2×107个，弃培养液，用预冷的1×PBS洗2-3次，离心 10min（1000rpm），弃上清 , 留下细胞沉淀备用。
3. 悬浮细胞：用预冷的1×PBS洗一遍，1000rpm , 离心10min，弃上清，留下细胞沉淀备用。
4. 每20u细胞沉淀加入200μl添加了PMSF和DTT的细胞浆蛋白抽提试剂A。
5. 最高速剧烈涡旋5s，把细胞沉淀完全悬浮并分散开 , 冰浴10-15min。若没有完全分散开，可适当延长涡旋时间。
6. 加入10μl细胞浆蛋白抽提试剂B，最高速剧烈涡旋5s，冰浴1min。
7. 最高速剧烈涡旋5s，12000rpm，4 ℃离心5min, 取上清即为细胞浆蛋白。
8. 对于沉淀，完全吸尽残余的上清，加入50ul添加了PMSF和DTT的细胞核蛋白抽提试剂C。
9. 最高速剧烈涡旋15-30s后放回冰浴中，每隔1-2min再涡旋15-30s，共30min。
10. 12000rpm，4 ℃离心 , 取上清即为细胞核蛋白。
11. 组织 :
（1）取60mg组织 , 尽可能切成非常细小的碎片 , 加入200μl细胞浆蛋白抽提试剂A与10μl细胞浆蛋白抽提试剂B , 并加入PMSF和DTT至其终浓度为1mM , 在玻璃匀浆 液内充分匀浆 , 匀浆需在冰浴或4℃进行。
（2）匀浆后把匀浆液转移至预冷的离心管中，4 ℃离心5min，冰浴放置15min。
（3）12000rpm， 4℃离心5min 。把上清转移至一预冷的离心管中，即为抽提到的部分细胞浆蛋白。
（4）对于沉淀，继续按照步骤4-10开始操作 , 即得到细胞浆蛋白和细胞核蛋白 , 其中细胞浆蛋白可以和步骤11中抽提到的细胞浆蛋白合并使用。
产品名称：核蛋白和浆蛋白提取试剂盒-50T（试用装10T）
产品概述：
核蛋白和浆蛋白提取试剂盒（Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit）提供了一种比较简单、方便的从细胞或组织中提取细胞核蛋白和浆蛋白的方法 , 约90min就可以完成细胞核蛋白与浆蛋白的分离。制备的核蛋白和浆蛋白能保持天然活性，且纯度较高 , 可用于 E 进一步的转录因子活性分析、酶活性测定等后续蛋白质研究。Western blot、co-IP、 MSA（也称gel shift）、footprinting进一步的转录因子活性分析、酶活性测定等后续蛋白质研究。
本试剂盒是通过细胞浆蛋白提取试剂A和B，在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀，然后破坏细胞膜，释放出细胞浆蛋白，然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的细胞核蛋白提取试剂C提取得到细胞核蛋白。
保存条件：
本试剂盒各试剂均于-20℃保存，自订购之日起一年内有效。
注意事项：
1. PMSF一定要在抽提试剂加入到样品中前2-3min内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
2. 抽提蛋白的所有步骤都需要在冰上或4 ℃进行。
3. 抽提到的核蛋白和浆蛋白均可直接用本公司生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒（WLA004）测定蛋白浓度 ，但不适合用Bradford法测定蛋白浓度。
该产品被引用文献（仅展示部分）：
1、Zhu Y; Chen S; Liu W, et al., IGF-1R/YAP signaling pathway is involved in collagen V-induced insulin biosynthesis and secretion in rat islet INS-1 cells. Connect Tissue Res 2022, 1-16.
PubMed: 35129018
2、Zhang J; Li Q; Sun Q, et al., Epigenetic modifications inhibit the expression of MARVELD1 and in turn tumorigenesis by regulating the Wnt/beta-catenin pathway in pan-cancer. J Cancer 2022, 13 (1), 225-242.
PubMed: 34976185
3、Liu W W; Wang F; Li C, et al., Silibinin relieves UVB-induced apoptosis of human skin cells by inhibiting the YAP-p73 pathway. Acta Pharmacol Sin 2021.
PubMed: 34912007
4、Li B; Wang Y; Zhao H, et al., Oxidative stress is involved in the activation of NF-kappaB signal pathway and immune inflammatory response in grass carp gill induced by cypermethrin and/or sulfamethoxazole. Environ Sci Pollut Res Int 2021.
PubMed: 34718981
5、Wu F; Huang Y; Wei G, et al., Exogenous Hsp70 attenuates nitroglycerin-induced migraine-like symptoms in mice. J Neurophysiol 2021, 126 (4), 1030-1037.
PubMed: 34469702
操作流程：
1. 室温溶解试剂盒中的三种试剂，溶解后立即放置在冰上。取适量的细胞浆蛋白抽提试剂A和细胞核蛋白抽提试剂C备用，在使用前数分钟内加入PMSF和DTT，使其终浓度均为1mM。
2. 贴壁细胞：取培养细胞2×106-2×107个，弃培养液，用预冷的1×PBS洗2-3次，离心 10min（1000rpm），弃上清 , 留下细胞沉淀备用。
3. 悬浮细胞：用预冷的1×PBS洗一遍，1000rpm , 离心10min，弃上清，留下细胞沉淀备用。
4. 每20u细胞沉淀加入200μl添加了PMSF和DTT的细胞浆蛋白抽提试剂A。
5. 最高速剧烈涡旋5s，把细胞沉淀完全悬浮并分散开 , 冰浴10-15min。若没有完全分散开，可适当延长涡旋时间。
6. 加入10μl细胞浆蛋白抽提试剂B，最高速剧烈涡旋5s，冰浴1min。
7. 最高速剧烈涡旋5s，12000rpm，4 ℃离心5min, 取上清即为细胞浆蛋白。
8. 对于沉淀，完全吸尽残余的上清，加入50ul添加了PMSF和DTT的细胞核蛋白抽提试剂C。
9. 最高速剧烈涡旋15-30s后放回冰浴中，每隔1-2min再涡旋15-30s，共30min。
10. 12000rpm，4 ℃离心 , 取上清即为细胞核蛋白。
11. 组织 :
（1）取60mg组织 , 尽可能切成非常细小的碎片 , 加入200μl细胞浆蛋白抽提试剂A与10μl细胞浆蛋白抽提试剂B , 并加入PMSF和DTT至其终浓度为1mM , 在玻璃匀浆 液内充分匀浆 , 匀浆需在冰浴或4℃进行。
（2）匀浆后把匀浆液转移至预冷的离心管中，4 ℃离心5min，冰浴放置15min。
（3）12000rpm， 4℃离心5min 。把上清转移至一预冷的离心管中，即为抽提到的部分细胞浆蛋白。
（4）对于沉淀，继续按照步骤4-10开始操作 , 即得到细胞浆蛋白和细胞核蛋白 , 其中细胞浆蛋白可以和步骤11中抽提到的细胞浆蛋白合并使用。
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1、Zhu Y; Chen S; Liu W, et al., IGF-1R/YAP signaling pathway is involved in collagen V-induced insulin biosynthesis and secretion in rat islet INS-1 cells. Connect Tissue Res 2022, 1-16.
PubMed: 35129018
2、Zhang J; Li Q; Sun Q, et al., Epigenetic modifications inhibit the expression of MARVELD1 and in turn tumorigenesis by regulating the Wnt/beta-catenin pathway in pan-cancer. J Cancer 2022, 13 (1), 225-242.
PubMed: 34976185
3、Liu W W; Wang F; Li C, et al., Silibinin relieves UVB-induced apoptosis of human skin cells by inhibiting the YAP-p73 pathway. Acta Pharmacol Sin 2021.
PubMed: 34912007
4、Li B; Wang Y; Zhao H, et al., Oxidative stress is involved in the activation of NF-kappaB signal pathway and immune inflammatory response in grass carp gill induced by cypermethrin and/or sulfamethoxazole. Environ Sci Pollut Res Int 2021.
PubMed: 34718981
5、Wu F; Huang Y; Wei G, et al., Exogenous Hsp70 attenuates nitroglycerin-induced migraine-like symptoms in mice. J Neurophysiol 2021, 126 (4), 1030-1037.
PubMed: 34469702
PubMed: 35129018
2、Zhang J; Li Q; Sun Q, et al., Epigenetic modifications inhibit the expression of MARVELD1 and in turn tumorigenesis by regulating the Wnt/beta-catenin pathway in pan-cancer. J Cancer 2022, 13 (1), 225-242.
PubMed: 34976185
3、Liu W W; Wang F; Li C, et al., Silibinin relieves UVB-induced apoptosis of human skin cells by inhibiting the YAP-p73 pathway. Acta Pharmacol Sin 2021.
PubMed: 34912007
4、Li B; Wang Y; Zhao H, et al., Oxidative stress is involved in the activation of NF-kappaB signal pathway and immune inflammatory response in grass carp gill induced by cypermethrin and/or sulfamethoxazole. Environ Sci Pollut Res Int 2021.
PubMed: 34718981
5、Wu F; Huang Y; Wei G, et al., Exogenous Hsp70 attenuates nitroglycerin-induced migraine-like symptoms in mice. J Neurophysiol 2021, 126 (4), 1030-1037.
PubMed: 34469702
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