组织解离液

组织解离液是由多种生物酶组成的混合物，可温和、快速、高效地将组织中的结缔组织酶解并释放出细胞，形成细胞悬液。组织解离液适用于脾脏、肝脏、肾脏、胰腺、胃黏膜组织、胆囊、肿瘤组织等多种组织的细胞分离。解离组织获得的细胞具有高活性，可保留细胞的表面抗原等特点，细胞可用于细胞培养、细胞分选、药物筛选、单细胞测序等。

所需试剂、耗材、器械与仪器：

试剂：细胞培养基，红细胞裂解液（选用）

耗材：离心管，一次性无菌过滤器（70µm）

器械: 眼科剪、眼科镊

仪器：恒温摇床，离心机 

操作步骤：

(1) 取新鲜组织 100mg 左右加至无菌离心管中，用眼科剪将组织彻底剪碎至 1-2mm3 ，加入组织消化液 1ml。

(2) 将离心管置于恒温摇床上，37℃/180rpm 震荡孵育 60min 消化组织，可根据组织的不同适当延长消化时间。

(3) 孵育结束后将离心管内的组织匀浆用 70µm 无菌过滤器过滤，然后加入细胞培养基冲洗无菌过滤器，用 50ml 的离心管收集滤液。

(4) 将细胞悬液 1200rpm 离心 5min ，弃上清。

(5) 再加入适量培养基，1200rpm 离心 5min，弃上清。

(6) 用细胞培养基重悬细胞，取少量细胞镜下观察消化情况。

(7) 根据需要将细胞用于后续实验。

(8) （可选）可使用红细胞裂解液去除组织解离过程中的红细胞或死细胞。 

1、组织解离液可根据实际使用量进行分装，置于-20℃保存，随用随取，避免反复冻融。

2、组织解离液 2-8℃保存应不超过 48h, 2-8℃长时间保存会降低产品的解离效果。

3、若组织解离获取的细胞用于细胞培养，应保证所有操作均在无菌条件下完成。 

-20°C密封保存，有效期6个月。