单精子注射

一、技术定义与核心原理

单精子注射（ICSI） 是一种显微操作辅助生殖技术，通过物理方式将单个精子直接注入成熟卵母细胞的胞质内，强制完成受精过程。其核心原理包括：

1. 绕过自然受精屏障：
   • 规避精子获能、顶体反应及卵膜穿透等自然步骤，直接解决精子活力低下、形态异常或卵母细胞膜穿透障碍等问题。
2. 精卵强制融合：
   • 通过显微针机械刺激卵母细胞，激活钙振荡信号通路，启动胚胎发育。
3. 遗传物质高效利用：
   • 单精子即可完成受精，显著节省珍贵遗传资源（如濒危物种精液、死亡个体冷冻样本）。

生物学意义：ICSI不仅是受精失败（如多精入卵、精子无能）的补救方案，更是研究受精机制与胚胎发育的关键实验模型。

二、标准化操作流程（以马为例）

1. 卵母细胞采集与成熟

2. 精子处理与注射

• 精子来源：新鲜精液、冷冻复苏精液、附睾穿刺精子甚至死精（需化学激活）。
• 注射关键操作：
  • 精子制动：显微针机械损伤尾部，增强受精能力。
  • 显微注射：固定卵子→穿刺透明带→注入精子（需<0.5 pL胞质抽吸验证）。
    
     

3. 胚胎培养与移植

• 体外培养：受精卵在KSOM/SOF培养基中培养至囊胚（约7–10天）。
• 移植策略：
  • 手术移植：早期胚胎植入受体输卵管（高妊娠率但侵入性强）。
  • 非手术移植：囊胚期经宫颈植入子宫（主流趋势）。