体外受精

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  • 2025年12月17日
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      伊莱博生物科技(上海)有限公司

    • 服务名称

      体外受精

    一、定义与技术原理

    动物体外受精(IVF) 指在人工模拟的体内环境中,使哺乳动物的精子和卵子完成受精过程的技术。受精后形成的胚胎可移植至受体子宫发育,所得后代称“试管动物”(test-tube animal)。
    核心生物学原理

    1. 精子获能(Capacitation)
      • 精子需去除表面“去能因子”(如糖蛋白),通过添加肝素、钙离子或血清白蛋白诱导获能,增强运动能力与穿透卵子能力。
      • 获能过程依赖物种特异性条件(小鼠需30分钟,猪需2–3小时)。
    2. 卵母细胞成熟(Oocyte Maturation)
      • 体内成熟卵子可直接使用;未成熟卵子需体外培养至MII期(第二次减数分裂中期)。
    3. 受精兼容性:人工环境需模拟输卵管生理条件(温度、pH、渗透压、营养)以支持精卵结合。

    二、标准化操作流程

    1. 卵母细胞采集与处理

    方法 适用场景 操作要点
    超数排卵法 实验动物(小鼠、大鼠) 注射FSH/LH激素诱导多排卵,从输卵管采集成熟卵子
    活体卵巢穿刺法 小牲畜(牛、羊)临床操作 超声或腹腔镜引导采集活体卵巢卵子
    宰杀后卵巢采集法 屠宰场资源利用 取新鲜卵巢分离未成熟卵子,体外培养成熟

    2. 精子采集与获能

    • 采集:附睾穿刺或精液收集。
    • 获能处理
      • 化学法:添加肝素(牛)、钙离子载体(小鼠)。
      • 生物法:与含卵丘细胞的卵泡液共培养。

    3. 体外受精

    技术 原理 应用场景
    共培养法 精卵在培养液中自然结合 常规IVF(牛、小鼠)
    显微注射法(ICSI) 直接注入单个精子至卵胞质 低活力精子或基因编辑动物

    4. 胚胎培养与评估

    • 培养基:KSOM+AA(小鼠)、SOF(牛)、TALP系列(跨物种)。
    • 发育监测:形态学分级(A级:细胞均匀、碎片<10%)。

    5. 胚胎移植或冷冻

    • 移植:同步受体发情周期,手术/非手术法植入子宫。
    • 冷冻保存:液氮(-196℃)长期储存遗传资源。

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