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- 上海
- 2026年01月19日
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伊莱博生物科技（上海）有限公司
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体外受精
一、定义与技术原理
动物体外受精（IVF） 指在人工模拟的体内环境中，使哺乳动物的精子和卵子完成受精过程的技术。受精后形成的胚胎可移植至受体子宫发育，所得后代称“试管动物”（test-tube animal）。
核心生物学原理：
- 精子获能（Capacitation）：
- 精子需去除表面“去能因子”（如糖蛋白），通过添加肝素、钙离子或血清白蛋白诱导获能，增强运动能力与穿透卵子能力。
- 获能过程依赖物种特异性条件（小鼠需30分钟，猪需2–3小时）。
- 卵母细胞成熟（Oocyte Maturation）：
- 体内成熟卵子可直接使用；未成熟卵子需体外培养至MII期（第二次减数分裂中期）。
- 受精兼容性：人工环境需模拟输卵管生理条件（温度、pH、渗透压、营养）以支持精卵结合。
二、标准化操作流程
1. 卵母细胞采集与处理
| 方法 | 适用场景 | 操作要点 |
|---|---|---|
| 超数排卵法 | 实验动物（小鼠、大鼠） | 注射FSH/LH激素诱导多排卵，从输卵管采集成熟卵子 |
| 活体卵巢穿刺法 | 小牲畜（牛、羊）临床操作 | 超声或腹腔镜引导采集活体卵巢卵子 |
| 宰杀后卵巢采集法 | 屠宰场资源利用 | 取新鲜卵巢分离未成熟卵子，体外培养成熟 |
2. 精子采集与获能
- 采集：附睾穿刺或精液收集。
- 获能处理：
- 化学法：添加肝素（牛）、钙离子载体（小鼠）。
- 生物法：与含卵丘细胞的卵泡液共培养。
3. 体外受精
| 技术 | 原理 | 应用场景 |
|---|---|---|
| 共培养法 | 精卵在培养液中自然结合 | 常规IVF（牛、小鼠） |
| 显微注射法（ICSI） | 直接注入单个精子至卵胞质 | 低活力精子或基因编辑动物 |
4. 胚胎培养与评估
- 培养基：KSOM+AA（小鼠）、SOF（牛）、TALP系列（跨物种）。
- 发育监测：形态学分级（A级：细胞均匀、碎片<10%）。
5. 胚胎移植或冷冻
- 移植：同步受体发情周期，手术/非手术法植入子宫。
- 冷冻保存：液氮（-196℃）长期储存遗传资源。
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文献和实验成熟的两性生殖细胞（精子和卵），由亲体排出体外，一般在水中相遇而融合。如一部分无脊椎动物和大多数鱼类、两栖类等均属于体外受精动物。
小鼠体外受精过程中被最容易被忽略的3个影响因素 体外受精(In Vitro Fertilization)是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术，英文简称为IVF。小吉今天就和大家分享下在小鼠体外受精过程中最容易被忽略的3个实验影响因素。 因素一：你对实验的品系了解吗？ 体外受精目前基本适用于各个背景小鼠，但是其受精率随着品系的不同，会有所差异，甚至是比较大的差异，如NOD背景小鼠，其在超排后卵子异形率高，从而导致受精率整体较低，很多实验工作者发现受精率低，胚胎“丑
异种体外受精是将不同种动物的雌雄配子模拟体内条件混台培养使其融合受精的一项生物高技术。通常采用金黄地鼠卵为雌配子与各种哺乳动物或人的精子进行实验 ，因此又称精子穿透试验(SPA)。人精子与地鼠卵体外受精结果与人同种体外授精呈高度正相关系。可取代人卵用来检测人精子的受精能力。SPA可反映精子获能、顶体反应精卵相互作用诸多方面的功能，因此可用于以上方面的生理学、药理学和毒理学角度的研究。目前国际上已广泛采用SPA作为不育症诊治和男性生育力鉴定技术及生殖研究的实验模型。 1.1 实验准备与操作
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