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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
188
- 英文名:
Stbl3 Chemically Competent Cell
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
冻存管
中文名称:Stbl3化学感受态细胞
英文名称:Stbl3 Chemically Competent Cell
形式:冻存管
培养基:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,琼脂:15.0,pH:7.0±0.1(25℃)
生长条件:37℃;18-24h;好氧 存储条件 -80℃
安全等级:1
操作步骤:
1.Stbl3感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入0.9 mL 室温S.O.C. 培养基或LB培养基(推荐使用SOC培养基,可提高转化效率)。
4.30℃,225 rpm复苏90分钟。(当质粒中含有不稳定片段时, 30℃培养可降低错误重组的概率,若转化controlPUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟。)
5.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 培养基上。
6.将平板倒置放于30℃培养箱过夜培养。(若转化controlPUC19 计算转化效率,则需37℃培养过夜)
英文名称:Stbl3 Chemically Competent Cell
形式:冻存管
培养基:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,琼脂:15.0,pH:7.0±0.1(25℃)
生长条件:37℃;18-24h;好氧 存储条件 -80℃
安全等级:1
操作步骤:
1.Stbl3感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入0.9 mL 室温S.O.C. 培养基或LB培养基(推荐使用SOC培养基,可提高转化效率)。
4.30℃,225 rpm复苏90分钟。(当质粒中含有不稳定片段时, 30℃培养可降低错误重组的概率,若转化controlPUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟。)
5.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 培养基上。
6.将平板倒置放于30℃培养箱过夜培养。(若转化controlPUC19 计算转化效率,则需37℃培养过夜)
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文献和实验该产品被引用文献
Stbl3化学感受态细胞
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