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解决问题
(1) 鉴定敏感肿瘤细胞系(2) 确定合适的适应症
(3) 筛选最敏感的肿瘤细胞系用于细胞模型或CDX
(4) 确定基因组特征以预测抗癌药物反应(选项)
分类
(1)自由组合Cell Panel• 爱思益普细胞库有500+ 人肿瘤细胞系 (50株细胞系/月采购)
• 合作者可以选择细胞库中任何感兴趣的人肿瘤细胞系组成Cell Panel用于受试物筛选
图.1 ICE Cell Panel 人肿瘤细胞系组成图
(2)固定Cell Panel
170 个人肿瘤细胞系涵盖21种肿瘤类型
图.2 ICE_CP170 人肿瘤细胞系组成图
试验设计
(1) 对照: High control: 溶媒Low control: 培养基
阳参化合物: Staurosporine
(2) 报告
项目信息,试剂耗材及仪器设备信息,步骤,受试物稀释信息,布板信息,原始数据,结果及汇总结果等
(3) 受试物要求: 简言之, 100 µL 储液,1000×是其最高测试浓度(固体受试物由此推之).
(4) 可以支持生物标志物和蛋白质降解分析 (可选)
试验步骤
(1)细胞接种于384孔板(2) 过夜培养,ECHO 自动添加受试物
(3) 细胞按照COA提供的条件进行维持培养
(4) CellTiter-Gio检测.
图.3 试验流程
阳参数据的重现性
测试周期
(1) <20株细胞系:1-2周(2) 20~30株细胞系:2-3周
(3) 30~40株细胞系: 3-4 周
(4) 40~50株细胞系:4-5 周
(5) 100 株细胞系:6-7周
(6) 100株细胞系:6-7 周
(7) 150株细胞系:7-8周
(8) 200株细胞系:8-9 周
(9) 170株固细胞系:7-8 周
优势
(1) 即到即检。(2) 节约预算成本
(3) 实验周期短
(4) 数据可重复好
(5) 单药或药物联用皆可
(6) 生物信息学深度分析(可选)
其他检测方法
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文献和实验枪法(Biolistic-bombardment)(植物细胞) Transfer of T-DNA from Agrobacterium into a plant cell Regeneration of leaf disks infected by Agrobacterium DNA重组 外源基因插入与否可通过载体上的Lac Z基因进行初步的筛选。有外源基因插入的细菌呈白斑,无外源基因插入的细菌呈蓝斑
Adult human mesenchymal stem cells (hMSC) are rare fibroblast-like cells capable of differentiation into a variety of cell tissues which include bone, cartilage, muscle, ligament, tendon, and adipose. Normal adult bone marrow and adipose
要求,以免被要求补数据。 为了可以很快的筛选到阳性克隆可以通过如下几个方式去进行优化: 1、尽可能提高单细胞的存活率。 a)对于单个细胞很难存活的细胞,如果是贴壁细胞,可以试着加一些细胞因子促进细胞的分裂;而对于悬浮细胞,则推荐采用Cell Plaza(共培养的原理),都可以极大的提高细胞的存活率; b)对于很容易老化的细胞,推荐对细胞进行永生化改造,永生化的方法有很多,这里不做具体推荐。 2、采用能够快速抽提微量样品基因
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