蛋白亲和力检测之微量热涌动（MST）技术

原理简介：
  MST技术是一种基于检测在温度梯度中的生物分子电泳迁移率的变化而检测生物分子间结合、解离过程，获取分子间相互作用的模式和动力学常数等方面信息的新技术。其原理为波长1480 nm的红外激光通过分色镜照射到毛细管中的样品，样品中的水分子吸收红外光发热而形成温度梯度。通过聚焦的红外激光加热毛细管之中的溶液，同时通过hot mirror来检测荧光。毛细管中的荧光可以通过光学二极管来成像，然后将加热中心的标准化荧光对时间绘图。随后荧光由于温度的增加而降低，荧光分子由于受到热泳动的作用而移出加热中心。
荧光分子最初是自由均匀分布的，在红外激光照射下，分子受到热泳动的作用力，从加热区域向低温区域移动，同时分子又受到浓度梯度和质量扩散力的作用，最后分子在热泳动作用力和质量扩散作用力下达到平衡，形成稳定态。
通过荧光染料标记、荧光融合蛋白、色氨酸自发荧光等信号追踪，把分子在微观温度梯度场中的定向移动进行探测和量化，从而分析样品中分子之间的相互作用力。（原理如图）

微量热涌动（MicroScale Thermophoresis，MST）技术原理图


实验流程：

案例展示：

技术服务范畴：
1、蛋白-小分子相互作用分析
2、蛋白-肽相互作用分析
3、蛋白-蛋白相互作用分析
4、肽-肽相互作用分析
5、蛋白-核酸相互作用分析
6、核酸适配子-小分子相互作用分析
7、药物筛选
技术服务优势：
1、可以任何溶液中分析分子间的相互作用（包括细胞裂解液、血清、含去污剂或有机溶剂等各种溶液）,结合GFP/YFP/RFP融合蛋白则可以无需纯化样品，直接在细胞裂解液中直接测量分析。
2、适于复杂体系研究，如三聚体组装
3、可在生理条件下，如在血清、细胞裂解液中检测样品的相互作用力
4、MST在缓冲液中操作，样品无需任何表面固定，对于体积较大、不稳定的样品友好
5、可以检测蛋白样品的聚集和分析人为操作带来的误差