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- 提供商:
深圳华大基因科技服务有限公司
- 服务名称:
真核转录组测序
- 规格:
200 µg/ml
转录组测序,对某一物种或特定细胞在某一功能状态下产生的mRNA进行高通量测序,既可以提供定量分析,检测基因表达水平差异,又可以提供结构分析,能发现稀有转录本,精确地识别可变剪切位点、基因融合等,而且不依赖于参考基因组。
技术优势
任意物种的全转录组分析:无需预先设计特异性探针,因此无需了解物种基因或基因组信息,能够直接对任何物种进行全面的转录组分析;
覆盖度高:数字化信号,直接测定几乎所有转录本片段的序列;
检测阈值宽:跨越6个数量级的宽检测阈值,从几个到数十万个拷贝精确计数;
分辨率高:可以检测基因家族中相似基因及可变剪接造成的单碱基差异;
检测范围广:从几个到数十万个拷贝精确计数,可同时鉴定及定量正常和稀有的转录本。
产品应用
医学上的应用方向:

农学上的应用方向:

研究内容
一、无参考序列物种
标准信息分析:
1. 测序数据过滤;
2. 转录组de novo组装;
3. Unigene七大功能数据库注释;
4. Unigene的CDS预测;
5. Unigene的TF编码能力预测;
6. Unigene的SSR检测;
7. Unigene表达量计算(基因表达水平、PCA分析、基因表达水平箱线图和密度图、样品间的表达量韦恩图);
8. 时间序列分析;
9. 差异表达基因检测;
10. 差异表达基因聚类分析;
11. 差异表达基因GO功能分析;
12. 差异表达基因Pathway功能分析;
13. 差异基因蛋白互作分析;
14. 真菌致病基因预测 (真菌样本);
15. 植物抗病基因预测(植物样本)。
定制化信息分析:
1. 可结合客户的需求,协商确定定制化信息分析内容。
二、有参考序列物种
标准信息分析:
1. 基本数据统计① 去除接头序列、低质量序列得到reads信息,② 样品相关性,③ 表达量分布,④ RNA分类;
2. 参考基因组比对;
3. mRNA鉴定;
4. mRNA定量分析;
5. mRNA差异表达分析(样本间、组间);
6. mRNA表达/差异基因聚类;
7. mRNA差异基因GO分类、富集;
8. mRNA差异基因KEGG分类、富集;
9. mRNA结构分析:可变剪切分析;
10. mRNA结构分析:融合基因分析(仅限人)。
Dr. Tom信息分析:
一)数据库注释
1. 转录因子注释(AnimalTFDB/PlantTFDB);
2. GSEA分析;
3. Rfam、Pfam、Reactome、COG、EggNOG和InterPro数据库注释;
二)互作网络分析
1. 靶基因分析① miRNA-mRNA靶向关系分析,② lncRNA-mRNA靶向关系分析;
2. ceRNA互作网络分析;
3. 蛋白互作网络分析;
4. 共表达互作网络分析;
三)特色分析
1. 自定义标签和自有数据上传;
2. 外部数据库信息(TCGA、ARCHS4);
3. 关键驱动基因网络图分析;
4. 时间序列分析。
(*以上分析内容为部分物种可做。)
定制化信息分析 :
1. 可结合客户的需求,协商确定定制化信息分析内容
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文献和实验结合细胞在组织中分布的位置信息和转录组基因表达信息,了解细胞在空间背景下的异质性。
研究意义;而同样情况下RASGRP1的检测数据可能不能说明问题。 由此可知,设计的实验如果没有生物学重复,或者生物学重复的数量不够,就不能得到有统计意义的实验结果;获得的差异表达的基因很可能仅仅是少数个体差异的表现,并不能反映疾病或者某种特定生理状态的群体本质特征。 3.生物学重复设置几个合适? 您是不是有同样的问题:转录组测序是否必须进行生物学重复啊,是否要3个重复,是否可以用3个样品的RNA等量混合代替生物学重复,如果不重复能否发文章…..?一方面是有限的经费,一方面是编辑的质疑;实在很难
案例:应用全基因组测序和 RNA 测序来描绘常见的变异型免疫缺陷综合症(CVIDs)的基因图谱 背景:常见的变异型免疫缺陷综合症(CVIDs)是机体免疫应答反应中不能产生抗体的最主要原因。CVIDs 变异度很高,大概 5% 的病人是由基因改变引起的。 目的:利用 Illumina HiSeq2500 和 HTSeq 测序平台对 CVIDs 进行全基因组及转录水平的研究,揭示并绘制 CVIDs 的信号调控图谱。 结果:通过对 CVIDs 基因组和转录组进行测序和综合
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