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- 2025年06月21日
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RNA干扰载体构建
RNA 干扰是真核生物中存在的一种抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制,具有重大生物学意义.
普尔普乐专业提供shRNA靶点序列设计合成，并构建到相应的载体。
服务特色：
1。根据提供的cDNA序列，设计3条shRNA序列，并保证至少1条超过70%的干扰效果.
2。客户提供shRNA序列，按照普通的载体构建收费。
RNA载体构建技术服务流程：
1.microRNA靶点的预测
利用软件得到的目的microRNA的预测靶点。
2.获得microRNA对应DNA模板
根据提供的靶序列，合成两条互补的单链DNA模板。或者，设计引物PCR扩增microRNA靶基因3’UTR序列。
3.microRNA靶序列克隆
将合成的两条单链退火成双链（具有粘性末端），或将PCR产物双酶切，后连入经过同样双酶切的miR-reporter载体中，连接产物转化大肠杆菌。
4.阳性克隆鉴定。
挑选转化的菌落，PCR筛选含有插入片段的阳性克隆，测序验证克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
普尔普乐专业提供shRNA靶点序列设计合成，并构建到相应的载体。
服务特色：
1。根据提供的cDNA序列，设计3条shRNA序列，并保证至少1条超过70%的干扰效果.
2。客户提供shRNA序列，按照普通的载体构建收费。
RNA载体构建技术服务流程：
1.microRNA靶点的预测
利用软件得到的目的microRNA的预测靶点。
2.获得microRNA对应DNA模板
根据提供的靶序列，合成两条互补的单链DNA模板。或者，设计引物PCR扩增microRNA靶基因3’UTR序列。
3.microRNA靶序列克隆
将合成的两条单链退火成双链（具有粘性末端），或将PCR产物双酶切，后连入经过同样双酶切的miR-reporter载体中，连接产物转化大肠杆菌。
4.阳性克隆鉴定。
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