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- 2025年06月21日
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- 文献和实验
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- 服务名称：
RNA干扰载体构建
RNA 干扰是真核生物中存在的一种抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制,具有重大生物学意义.
普尔普乐专业提供shRNA靶点序列设计合成，并构建到相应的载体。
服务特色：
1。根据提供的cDNA序列，设计3条shRNA序列，并保证至少1条超过70%的干扰效果.
2。客户提供shRNA序列，按照普通的载体构建收费。
RNA载体构建技术服务流程：
1.microRNA靶点的预测
利用软件得到的目的microRNA的预测靶点。
2.获得microRNA对应DNA模板
根据提供的靶序列，合成两条互补的单链DNA模板。或者，设计引物PCR扩增microRNA靶基因3’UTR序列。
3.microRNA靶序列克隆
将合成的两条单链退火成双链（具有粘性末端），或将PCR产物双酶切，后连入经过同样双酶切的miR-reporter载体中，连接产物转化大肠杆菌。
4.阳性克隆鉴定。
挑选转化的菌落，PCR筛选含有插入片段的阳性克隆，测序验证克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
普尔普乐专业提供shRNA靶点序列设计合成，并构建到相应的载体。
服务特色：
1。根据提供的cDNA序列，设计3条shRNA序列，并保证至少1条超过70%的干扰效果.
2。客户提供shRNA序列，按照普通的载体构建收费。
RNA载体构建技术服务流程：
1.microRNA靶点的预测
利用软件得到的目的microRNA的预测靶点。
2.获得microRNA对应DNA模板
根据提供的靶序列，合成两条互补的单链DNA模板。或者，设计引物PCR扩增microRNA靶基因3’UTR序列。
3.microRNA靶序列克隆
将合成的两条单链退火成双链（具有粘性末端），或将PCR产物双酶切，后连入经过同样双酶切的miR-reporter载体中，连接产物转化大肠杆菌。
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文献和实验相关实验
RNA干扰 RNA干扰（RNA interference，缩写为RNAi）是指一种分子生物学上由双链RNA诱发的基因沉默现象，其机制是通过阻碍特定基因的翻译或转录来抑制基因表达。当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA时，该mRNA发生降解而导致基因表达沉默。RNAi在基因沉默(silent gene)方面具有高效性和简单性，所以是基因功能研究的重要工具。 siRNA是一类长约21～25 个核苷酸的双链小RNA分子，可作为一种特殊引物,在RNA 依赖RNA聚合
1、载体基本介绍 2、载体分类及应用 3、载体构建及应用注意事项
慢病毒载体构建.pdf
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RNA干扰载体构建
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