靶向GPR65通过抑制JNK和NF-κB通路减轻肝脏炎症和纤维化

背景：G蛋白偶联受体（GPCRs）被认为是药物治疗的有吸引力的靶点。然而，除了少数趋化因子受体外，GPCRs如何调节肝纤维化的进展仍知之甚少。在此，我们旨在揭示质子感应受体GPR65在肝纤维化中的作用，并阐明其潜在机制。方法：评估了GPR65在人和小鼠纤维化肝脏中的表达水平。此外，用胆管结扎（BDL）21天或四氯化碳（CCl4）8周处理Gpr65缺陷小鼠，以研究GPR65在肝纤维化中的作用。结合Western blotting、定量实时逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）和酶联免疫吸附测定（ELISA）、共聚焦显微镜和拯救研究等实验方法，探讨GPR65在肝纤维化中作用的潜在机制。此外，研究了GPR65抑制剂在肝纤维化发展中的治疗潜力。结果：我们发现肝巨噬细胞（HMs）富集的GPR65在人和小鼠纤维化肝脏中均上调。此外，Gpr65敲除显著减轻了体内BDL和CCl4诱导的肝脏炎症、损伤和纤维化，小鼠骨髓移植（BMT）实验进一步证明Gpr65敲除的保护作用主要由骨髓源性巨噬细胞（BMMs）介导。此外，体外数据表明，Gpr65沉默和GPR65拮抗剂抑制，而GPR65过表达以及GPR65内源性和外源性激动剂的应用增强肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和转化生长因子-β（TGF-β）的表达和释放，所有这些随后促进肝星状细胞（HSCs）的活化和肝细胞（HCs）的损伤。机制上，GPR65过表达、酸性pH和GPR65外源性激动剂通过Gαq-Ca2+-JNK/NF-κB通路诱导TNF-α和IL-6的上调，而通过Gαq-Ca2+-MLK3-MKK7-JNK通路促进TGF-β的表达。值得注意的是，药理学GPR65抑制延缓了体内炎症、HCs损伤和纤维化的发展。结论：GPR65是调节肝纤维化进展的主要调节因子。因此，靶向GPR65可能是预防肝纤维化的有效治疗策略。