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实验问答

28,829,658 科研人在看

问细胞免疫化学染色步骤有哪些？

loveliufudan

细胞免疫化学染色的主要步骤包括:1. 细胞爬片制备:将细胞铺展在玻片上,可以制成悬液滴片或细胞爬片。2. 固定:使用甲醛或乙醇等固定液固定细胞,保持细胞形态和目标抗原。3. 渗透处理:使用 Triton X-100 等渗透剂增加细胞膜通透性,让抗体进入细胞。4. 封闭:使用牛血清等封闭液,封闭非特异性抗原结合位点。5. 一抗孵育:加入特异性一抗,与目标抗原特异性结合。6. 二抗孵育:加入标记的二抗

4 回答1096 围观

问细胞培养的生长过程有哪些阶段？

loveliufudan

细胞培养的生长过程通常可以分为以下几个阶段:1. Latent phase / Lag period 潜伏期这是细胞接触新环境后,准备适应环境的阶段。细胞会发生一些生理生化改变,但不会有明显的增殖。2. Log phase 对数增长期细胞开始快速增殖和分裂,呈指数增长。这时细胞群体数量以指数级增加。3. Stationary phase 稳态期当营养消耗和代谢废物堆积时,细胞增殖会放缓。细胞数量

5 回答5427 围观

问RNA干扰技术的基本原理有哪些？

loveliufudan

RNA干扰(RNAi)技术的基本原理主要包括以下几点:1. 引入双链RNA(dsRNA):外源性引入大小约20-25nt的小分子dsRNA。2. Dicer酶切成siRNA:细胞内Dicer酶会识别并切割长的dsRNA,生成小的siRNA。3. siRNA与mRNA互补结合:siRNA作为RNA诱导沉默复合体(RISC)的一部分,与目标mRNA的互补序列特异性结合。4. mRNA降解:结合后的mR

4 回答2536 围观

问为什么基础研究采用顺铂和缺血再灌注构建AKI小鼠模型

晓雨知春来

原因可能是因为顺铂和缺血再灌注构建AKI小鼠模型实验的简易性、可重复性

3 回答675 围观

问WB中单克隆抗体和多克隆抗体应该如何选择？有何区别？

麻黄连翘赤小豆

最好选择单克隆抗体，因为减少出现非特异性条带的出现。两者的区别在于前者由动物细胞产生，贵，单一抗原表位抗体；后者动物血清产生，便宜，属于多种抗原表位抗体

6 回答10580 围观

问药代动力学参数的测定实验

huarenqiang5

药代动力学参数主要有如下几种:1）表观分布容积。2）血浆药物浓度。3）血药浓度-时间曲线。4）血浆药物峰度浓度。5）血浆药物浓度达峰时间。6）血浆生物半衰期。7）药-时曲线下面积（AUC）。8）生物利用度。9）血浆蛋白结合率。

3 回答766 围观

问如何在质粒中添加一个新的酶切位点？使用双酶切？保护碱基如何添加，是否考虑移码突变？

loveliufudan

在质粒中添加新的酶切位点,可以考虑使用双酶切的方法:1. 设计引物,使其包含希望添加的酶切位点序列。例如要添加一个XhoI位点,引物中的序列可以是5’-CCGCTCGAGGG-3’。2. 使用引物对模板DNA进行PCR扩增,得到包含额外酶切位点的DNA片段。3. 将PCR产物和质粒进行双酶切,利用所添加的酶切位点(如XhoI)和质粒上的另一个酶切位点(如EcoRI),让二者形成互补的粘性末端。4.

4 回答11583 围观

问SCI投稿上传tiff或PDF格式都超过最大MB无法上传

loveliufudan

可以考虑以下几点:1. 使用图像压缩软件,将TIFF或PDF图片进一步压缩,降低分辨率和质量,以减小文件大小。2. 将大图分段保存为多个小图,单独上传。调整图像大小,裁剪不必要空白部分。3. 转换文件格式,如TIFF转成JPG格式,可以明显减小文件大小。4. 直接插入图像到Word文档中,而不是以独立图文件上传。5. 与期刊编辑部沟通,询问是否可以分多次上传图片或者提供网络存储链接。6. 在图表中

3 回答4333 围观

问开题报告是要写哪些内容呀

此用户已注销

选题背景和选题意义。选题与时代发展、社会状况的关系。研究这个选题的目的和价值。文献述评。研究内容。指论文拟研究解决的问题。研究思路、方法和技术路线。模型建构、参考文献和写作进度。

9 回答1448 围观

问过表达的原理是什么呀？过表达最后得到的是基因上调吗

dxy_xextz7w2

基因过表达是指在目的基因上游加入调控元件，使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译，从而实现基因产物的过表达。基因过表达的机制很复杂，包括基因突变、DNA甲基化、组蛋白修饰等多种因素。过表达之后目的基因的表达是上调，而受目的基因调控的基因需要和没有表达目的基因的体系进行对比，一般是相反的趋势

9 回答7825 围观

问请问BDNF与IBA-1荧光共定位做不出来的原因是什么？

汤姆卜丽波

有可能是你的两个二抗会互相反应，或者IBA-1本身二抗特异性不高，可以换一个

3 回答627 围观

问中药石见穿中的迷迭香酸适合醇提还是适合水提？

晓雨知春来

中药石见穿中的迷迭香酸适合用乙醇提取。

4 回答686 围观

问用HPLC发检测时中药石见穿时，对照标准品可以选取迷迭香酸嘛？

晓雨知春来

用HPLC检测时中药石见穿时，对照标准品可以选用米迭香酸。

4 回答510 围观

问原代小鼠肺泡，骨髓巨噬细胞cd11b maker

loveliufudan

根据图像,有以下分析:1. F4/80主要标记组织激活的巨噬细胞,AM和BMDM都应该表达F4/80。2. CD11b主要标记单核细胞和肺泡巨噬细胞,AM理论上不表达CD11b。3. 从图片看,AM组CD11b染色呈阳性,说明AM中可能混杂了少量CD11b阳性细胞。4. BMDM组F4/80和CD11b均呈阳性,与理论一致。5. 考虑可能原因:(1) AM提取过程中有少量肺间质巨噬细胞混入(2)

3 回答2965 围观

问关于逆概率加权的疑问

huarenqiang5

通过过抽样和欠抽样解决样本不均衡 :（1）过抽样（over-sampling）：通过增加分类中少数类样本的数量来实现样本均衡，比较好的方法有SMOTE算法可以使用在线spss平台spssau进行分析。分析两独立样本T检验的数据格式，两组数据应放在同一列中，添加一列用来记录组别。分析时，x项放组别列，y项放成绩列。（2)欠采样:欠采样也被称为下采样，一般将将较大的类别数据进行缩减，直至和类型不

2 回答1030 围观

问求助，不知道应该选用什么作图方式

晓雨知春来

建议可以使用条形图，这样比较直观一点。

3 回答511 围观

问Graphpad复式柱状图

晓雨知春来

建议点击柱状图并在数据点”选项中将缺失数据组的标记(标记点或数据标签)取消显示这样就不会留下空标记.

3 回答1250 围观

问多变量孟德尔随机化的多效性检验（mr_egger的截距检验）

晓雨知春来

可以使用mr egger regression（）函数。

3 回答1818 围观

问在做分子对接，为什么xyz轴的数据都是0

晓雨知春来

很大可能是使用的软件出错，建议重启软件。

3 回答860 围观

问盆腔炎大鼠课题的制作和卵巢早衰课题选哪个比较好？感谢大家

dxy_nendle72

卵巢早衰的模型不好做，我们组之前的一个师姐做的就是癌症早衰的模型，做过了变成了凋亡模型，药物剂量小的话细胞还不衰老

5 回答434 围观

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