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        原代小鼠肺泡,骨髓巨噬细胞cd11b maker

        相关实验:体内活化巨噬细胞

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        可尔必思

        前段时间从原代小鼠体内提取了AM和BMDM做免疫细胞染色,测的F4/80和cd11b结果发现F4/80和cd11b均有荧光产生…按理说AM里应该不会有cd11b的莫非养的都是肺间质巨噬细胞?(IM)

        也做了阴性对照组发现并没有特异性结合产生…搞不懂了有大佬能帮忙指点一下么图1.2是AM 图3.4时BMDM

        感谢

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        3 个回答

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        晓雨知春来

        有帮助

        考虑是AM提取过程中有少量肺间质巨噬细胞混入,建议优化AM提取方法提高纯度。

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        可能是提取的过程中存在细胞污染,你下次再提取的之后建议用瑞氏-姬姆萨染色法和Diff-Quik染色法鉴定AM的纯度

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        根据图像,有以下分析:

        1. F4/80主要标记组织激活的巨噬细胞,AM和BMDM都应该表达F4/80。

        2. CD11b主要标记单核细胞和肺泡巨噬细胞,AM理论上不表达CD11b。

        3. 从图片看,AM组CD11b染色呈阳性,说明AM中可能混杂了少量CD11b阳性细胞。

        4. BMDM组F4/80和CD11b均呈阳性,与理论一致。

        5. 考虑可能原因:

        (1) AM提取过程中有少量肺间质巨噬细胞混入

        (2) AM在体外培养过程中活化,表达了CD11b

        (3) 抗体存在非特异性反应

        6. 建议:

        (1) 优化AM提取方法,提高纯度

        (2) 更换CD11b抗体,确定是否为非特异性反应

        (3) 加入CD11c等标记区分AM和间质巨噬细胞

        7. 整体来说,AM中存在CD11b阳性可能是提取过程引入少量混杂或非特异性造成。需要优化方法提高AM纯度和鉴定效果。

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