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实验问答

28,824,861 科研人在看

问怎么测水中的总氮总磷最恰当的方法是什么

loveliufudan

测定水样中总氮和总磷的常用方法主要有:1. 紫外分光光度法:原理是测定水样经过酸化、高温消解后产生的铵盐、硝酸盐以及磷酸盐的紫外吸收值,根据标准曲线计算氮、磷含量。该方法操作简便,可同时测定氮、磷,但检出限较高。2. 连续流动分析法:根据水样经还原、比色等反应后的颜色变化,利用流动注射分析仪连续监测和计算氮、磷含量。该方法精度好,灵敏度高,但仪器要求较高。3. 离子色谱法:根据水样中氮、磷不同形态

3 回答4145 围观

问蛋白组学的组织和细胞标本处理？

土井挞克树

蛋白组学一般选择强效裂解液，wb相对温和一些

3 回答520 围观

问怎么样将载体的启动子完整的切下来又将目的基因的启动子无缝克隆到载体上

土井挞克树

先用特异性内切酶进行切割，然后用dna连接酶进行连接

3 回答823 围观

问蛋白组学领域的期刊推荐

loveliufudan

蛋白组学方向审稿周期较短的期刊建议如下:1. Journal of ProteomicsJCR影响因子约5.5,审稿周期平均约1-2个月。国际著名的蛋白质组学专业期刊,发表质量高。2. ProteomicsJCR影响因子约3.5,审稿周期在1-2个月左右。也是蛋白质组学领域代表性期刊之一。3. Molecular & Cellular Proteomics JCR影响因子7.6,审稿周期

3 回答1476 围观

问请问如果在基层患者心电图提示ST-T段改变伴心悸这种情况，需要立即上送吗

此用户已注销

出现ST段改变，处理措施具体如下：1、如有明显的变化是严重的；2、如果病人有一定的临床症状，比如胸闷、心慌，而且胸闷时伴有头晕等症状的情况下，结合ST-T改变；如果发病时有明显的ST段下移提示有严重的血管狭窄，持续时间越长，病人症状下移的程度越深，伴随有病人的症状持续，说明有严重的冠脉狭窄，需要进一步就诊，住院做冠脉造影检查，必要时做支架治疗；3、部分病人ST段抬高，比如病人发病时有明显的T波高尖

4 回答1021 围观

问饲养过程中出现小鼠状态不佳的原因

生化检验分析

环境的改变，饮食习惯改变，或是有某些感染等等。

4 回答930 围观

问Hela细胞为什么转染不进去啊？

loveliufudan

HeLa细胞转染不成功的原因可能有以下几点:1. Lipo2000与DNA的比例可能不适合HeLa细胞,可以试试调整这比例,增加Lipo2000量。2. 汇合时间可能需要延长到10-15分钟,以提高Liposome包裹DNA的效率。3. HeLa细胞状态可能不佳,需要用对数生长期的健康细胞。提前24小时换新培养基可以改善细胞状态。4. 转染液加入细胞中的方式可以优化,滴加转染复合物要轻缓,平铺于整

3 回答1049 围观

问蛋白组学数据中，缺失值怎么补全？

此用户已注销

在处理这个问题上出现了一些填充缺失值比较准确地方法，如K个最近邻的缺失值填充法（KNN）、有序的K个最近邻填充法（SKNN）和奇异值分解法（SVD）。

3 回答2674 围观

问蛋白组学数据，有哪些归一化方法？

此用户已注销

蛋白归一化的方法主要包括两种:内标法和总蛋白法

3 回答2565 围观

问细胞免疫荧光去培养基开始用PBS洗时，没有undefined5min，就单纯冲洗三次会不会有影响

此用户已注销

如果没有三到五分钟单纯冲洗还是有影响的

7 回答926 围观

问蛋白质组结果一般需要哪些方面的生物信息学分析?

loveliufudan

蛋白组学实验结果获得原始数据后,通常需要进行以下生物信息学分析:1. 原始质谱数据的预处理,包括峰检测、去噪、滤波等,获得质谱图峰 intensitites。2. 数据库搜索,比对所检测肽段的质谱图,鉴定蛋白。3. 定量分析,提取定量信息,确定各蛋白的表达量。4. 差异性分析,寻找不同样本间表达差异蛋白。5. 生物信息注释,对差异蛋白进行GO、KEGG等pathway注释分析。6. 蛋白互作网络分

3 回答1195 围观

问蛋白质分离纯化的基本原则？

loveliufudan

蛋白质分离纯化的基本原则主要包括:1. 保持蛋白的生物活性:选择温和的缓冲系统,控制温度,加入稳定剂等,以保持蛋白的天然结构和活性。2. 渐进法纯化:通常需要多步骤分离,每一步移除一部分杂质,逐步提高目标蛋白纯度。3. 充分利用蛋白质的化学与物理性质差异进行分离:如大小、电荷、亲和特性等。4. 保持蛋白质溶解状态:控制pH、离子强度、去离子水溶液成分等关键因素。5. 避免蛋白质降解:加入抑制蛋白酶

4 回答1342 围观

问要是某物种没有全基因组数据该如何进行蛋白的鉴定？

loveliufudan

当某物种没有全基因组数据时,进行蛋白质组学分析鉴定蛋白会面临一定困难,但可以通过以下策略提高鉴定成功率:1. 收集该物种所有已有的基因序列数据,如EST、mRNA序列等,自建一个局部蛋白数据库。2. 通过同源比对,利用该物种亲缘近的其他物种的基因组和蛋白质组数据,构建一个扩展的参考数据库。3. 利用de novo序列分析软件分析MS/MS谱图,以不依赖数据库的方式鉴定部分肽段序列。4. 与其他拥有

3 回答594 围观

问全谱分析能鉴定到多少蛋白?定量分析呢？

loveliufudan

全谱分析(Shotgun Proteomics)和定量分析(Quantitative Proteomics)在蛋白质组学研究中所能鉴定的蛋白数量存在差异:1. 全谱分析主要目的是扩大蛋白质组的覆盖范围,鉴定样品中存在的所有蛋白质。一般能够鉴定上千到上万个蛋白。2. 定量分析在一定覆盖范围内,精确比较不同样本中蛋白的相对丰度。通常每次能定量数百到上千个蛋白。3. 全谱分析中,通过肽段组合、多次分析等

3 回答780 围观

问蛋白质组学中检索时的数据库选择标准是什么？

loveliufudan

3 回答682 围观

问质谱的蛋白质组学和芯片哪个更好出结果？

loveliufudan

质谱和蛋白芯片都是蛋白质组学研究中常用的技术手段,各有优势:1. 质谱技术可以进行高通量检测,定性定量结果准确,是目前研究中使用最广泛的技术。但需要纯化蛋白,操作步骤较复杂。2. 蛋白芯片直接从复杂样本中探测蛋白,操作简便,可以进行高通量筛选。但定量不如质谱精确,需要优化试剂选择。3. 质谱技术可以进行无标记定量,兼具发现研究和验证分析的优势。但仪器价格昂贵。4. 蛋白芯片价格相对便宜,可以自定义

4 回答1077 围观

问小白真诚提问，由于实验室无超速离心机，想提取多聚核糖体，除了蔗糖离心法，还有其他方法吗？

loveliufudan

除了蔗糖密度梯度离心法外,我建议您可以试试以下几种方法:1. 不同浓度NaCl提取:利用不同浓度NaCl溶液裂解细胞,低浓度NaCl可以提取溶酶体,高浓度NaCl溶液可以获得粗提多聚核糖体。2. 离子交换层析:利用DEAE-Sepharose等离子交换基质,依据多聚核糖体和杂质的不同电荷特性进行分离,不依赖离心力。3. Mg2+沉淀:利用Mg2+可以特异聚集多聚核糖体的原理,在适宜浓度Mg2+条件

4 回答2195 围观

问iTRAQ/TMT和Label-free技术都有哪些优缺点？

loveliufudan

iTRAQ/TMT和Label-free都是蛋白质组学研究中常用的定量技术,它们各有优缺点:iTRAQ/TMT的优点:1. 可以在同一实验中标记和定量多个样本,提高实验效率。2. 标记后样本混合检测,有利于减少技术误差。3. 标记反应简便,易于操作。4. 标记覆盖面广,可以定量绝大部分肽段。iTRAQ/TMT的缺点:1. 需要额外的标记实验步骤,增加实验复杂度。2. 标记试剂价格较高,会增加实验成

3 回答2121 围观

问蛋白标记技术需要前期准备什么?

loveliufudan

做蛋白标记技术(如iTRAQ)来进行差异蛋白质组学分析,主要的前期准备工作包括:1. 实验设计:确定比较组别,每个组别需要的样本量,重复次数等。2. 样本收集和处理:收集质量好、含量充足的样本,快速冷冻保存。免疫沉淀或ultrafiltration去除高丰度蛋白。3. 蛋白提取试验:优化裂解液配方和裂解条件,确保蛋白充分裂解和溶解。4. 蛋白定量:优化Bradford或BCA蛋白定量方法,确定样品

3 回答1449 围观

问在酶的定点突变研究中，某一特异的突变作用是导致酶活性消失，表明该突变残疾具有催化作用，为什么？

loveliufudan

在酶的定点突变研究中,如果某一特异的突变导致酶活性消失,则说明该突变残基很可能参与了酶的催化作用,原因如下:1. 酶催化反应的关键是酶活性中心。活性中心由催化作用的关键氨基酸残基组成。2. 如果突变导致这些关键氨基酸残基被改变,那么会直接破坏酶的空间结构,使催化作用部位无法正确形成。3. 从而使酶无法发挥催化作用,反应不能进行,所以酶活性会消失。4. 因此可以判断,该突变残基 participat

6 回答1140 围观

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