实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问细胞免疫化学染色步骤有哪些？

loveliufudan

细胞免疫化学染色的主要步骤包括:1. 细胞爬片制备:将细胞铺展在玻片上,可以制成悬液滴片或细胞爬片。2. 固定:使用甲醛或乙醇等固定液固定细胞,保持细胞形态和目标抗原。3. 渗透处理:使用 Triton X-100 等渗透剂增加细胞膜通透性,让抗体进入细胞。4. 封闭:使用牛血清等封闭液,封闭非特异性抗原结合位点。5. 一抗孵育:加入特异性一抗,与目标抗原特异性结合。6. 二抗孵育:加入标记的二抗

4 回答888 围观

问细胞培养的生长过程有哪些阶段？

loveliufudan

细胞培养的生长过程通常可以分为以下几个阶段:1. Latent phase / Lag period 潜伏期这是细胞接触新环境后,准备适应环境的阶段。细胞会发生一些生理生化改变,但不会有明显的增殖。2. Log phase 对数增长期细胞开始快速增殖和分裂,呈指数增长。这时细胞群体数量以指数级增加。3. Stationary phase 稳态期当营养消耗和代谢废物堆积时,细胞增殖会放缓。细胞数量

5 回答4483 围观

问RNA干扰技术的基本原理有哪些？

loveliufudan

RNA干扰(RNAi)技术的基本原理主要包括以下几点:1. 引入双链RNA(dsRNA):外源性引入大小约20-25nt的小分子dsRNA。2. Dicer酶切成siRNA:细胞内Dicer酶会识别并切割长的dsRNA,生成小的siRNA。3. siRNA与mRNA互补结合:siRNA作为RNA诱导沉默复合体(RISC)的一部分,与目标mRNA的互补序列特异性结合。4. mRNA降解:结合后的mR

4 回答1700 围观

问为什么基础研究采用顺铂和缺血再灌注构建AKI小鼠模型

晓雨知春来

原因可能是因为顺铂和缺血再灌注构建AKI小鼠模型实验的简易性、可重复性

3 回答492 围观

问WB中单克隆抗体和多克隆抗体应该如何选择？有何区别？

loveliufudan

选择使用单克隆抗体或多克隆抗体需要根据实验目的来决定:1. 单克隆抗体- 具有更高的特异性,只识别抗原上的单一表位。- 识别性更强,背景较清晰。- 更适合识别蛋白的不同修饰形式。- 批次间效果一致性较好。2. 多克隆抗体- 识别抗原上的多个表位,不容易失活。- 灵敏度高,通常可以检测到更低丰度的蛋白。- 更适合检测总蛋白表达水平。- 批次间效果差异大。综合考虑目标蛋白的丰度、所需识别的特异性区域等

6 回答9182 围观

问药代动力学参数的测定实验

huarenqiang5

药代动力学参数主要有如下几种:1）表观分布容积。2）血浆药物浓度。3）血药浓度-时间曲线。4）血浆药物峰度浓度。5）血浆药物浓度达峰时间。6）血浆生物半衰期。7）药-时曲线下面积（AUC）。8）生物利用度。9）血浆蛋白结合率。

3 回答564 围观

问如何在质粒中添加一个新的酶切位点？使用双酶切？保护碱基如何添加，是否考虑移码突变？

loveliufudan

在质粒中添加新的酶切位点,可以考虑使用双酶切的方法:1. 设计引物,使其包含希望添加的酶切位点序列。例如要添加一个XhoI位点,引物中的序列可以是5’-CCGCTCGAGGG-3’。2. 使用引物对模板DNA进行PCR扩增,得到包含额外酶切位点的DNA片段。3. 将PCR产物和质粒进行双酶切,利用所添加的酶切位点(如XhoI)和质粒上的另一个酶切位点(如EcoRI),让二者形成互补的粘性末端。4.

4 回答10056 围观

问SCI投稿上传tiff或PDF格式都超过最大MB无法上传

loveliufudan

可以考虑以下几点:1. 使用图像压缩软件,将TIFF或PDF图片进一步压缩,降低分辨率和质量,以减小文件大小。2. 将大图分段保存为多个小图,单独上传。调整图像大小,裁剪不必要空白部分。3. 转换文件格式,如TIFF转成JPG格式,可以明显减小文件大小。4. 直接插入图像到Word文档中,而不是以独立图文件上传。5. 与期刊编辑部沟通,询问是否可以分多次上传图片或者提供网络存储链接。6. 在图表中

3 回答2689 围观

问开题报告是要写哪些内容呀

此用户已注销

选题背景和选题意义。选题与时代发展、社会状况的关系。研究这个选题的目的和价值。文献述评。研究内容。指论文拟研究解决的问题。研究思路、方法和技术路线。模型建构、参考文献和写作进度。

9 回答537 围观

问请问BDNF与IBA-1荧光共定位做不出来的原因是什么？

汤姆卜丽波

有可能是你的两个二抗会互相反应，或者IBA-1本身二抗特异性不高，可以换一个

3 回答449 围观

问中药石见穿中的迷迭香酸适合醇提还是适合水提？

晓雨知春来

中药石见穿中的迷迭香酸适合用乙醇提取。

4 回答433 围观

问用HPLC发检测时中药石见穿时，对照标准品可以选取迷迭香酸嘛？

晓雨知春来

用HPLC检测时中药石见穿时，对照标准品可以选用米迭香酸。

4 回答348 围观

问原代小鼠肺泡，骨髓巨噬细胞cd11b maker

loveliufudan

根据图像,有以下分析:1. F4/80主要标记组织激活的巨噬细胞,AM和BMDM都应该表达F4/80。2. CD11b主要标记单核细胞和肺泡巨噬细胞,AM理论上不表达CD11b。3. 从图片看,AM组CD11b染色呈阳性,说明AM中可能混杂了少量CD11b阳性细胞。4. BMDM组F4/80和CD11b均呈阳性,与理论一致。5. 考虑可能原因:(1) AM提取过程中有少量肺间质巨噬细胞混入(2)

3 回答2266 围观

问关于秩和检验的疑惑

晓雨知春来

如果X1的方差大于X2的方差，则X1大于X2。如果变量是离散变量，则可以使用y2检验或F检验进行比较

3 回答706 围观

问网状meta分析敏感性分析

晓雨知春来

改变纳入排除标准或剔除某类文献后再进行效应量合并是常用的敏感性分析方法之一。

3 回答1842 围观

问关于逆概率加权的疑问

huarenqiang5

通过过抽样和欠抽样解决样本不均衡 :（1）过抽样（over-sampling）：通过增加分类中少数类样本的数量来实现样本均衡，比较好的方法有SMOTE算法可以使用在线spss平台spssau进行分析。分析两独立样本T检验的数据格式，两组数据应放在同一列中，添加一列用来记录组别。分析时，x项放组别列，y项放成绩列。（2)欠采样:欠采样也被称为下采样，一般将将较大的类别数据进行缩减，直至和类型不

2 回答780 围观

问求助，不知道应该选用什么作图方式

晓雨知春来

建议可以使用条形图，这样比较直观一点。

3 回答305 围观

问Graphpad复式柱状图

晓雨知春来

建议点击柱状图并在数据点”选项中将缺失数据组的标记(标记点或数据标签)取消显示这样就不会留下空标记.

3 回答934 围观

问多变量孟德尔随机化的多效性检验（mr_egger的截距检验）

晓雨知春来

可以使用mr egger regression（）函数。

3 回答1362 围观

问在做分子对接，为什么xyz轴的数据都是0

晓雨知春来

很大可能是使用的软件出错，建议重启软件。

3 回答546 围观

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