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        请问qpcr扩增曲线溶解曲线都是锯齿状的是什么原因啊?

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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        刘芷谷

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        4 个回答

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        土井挞克树

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        实验操作问题:PCR反应管没有盖紧,反应液泄露;PCR反应液有挂壁


        模板问题:RNA纯度低,扩增信号太弱


        仪器本身的问题:长时间未校正,荧光不稳定;使用过度,荧光收集不稳定

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        考虑可能是ROX添加不当导致的异常结果。可以尝试去掉ROX分析数据,看一下重复性是否OK(复孔间STD<0.2),如果还是不行,只能下次实验的时候注意千万不要加错ROX。

        user-title

        sswei

        有帮助

        荧光信号采集不当,多次采集信号(或未采集荧光信号)。

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        此用户已注销

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        锯齿状无非是下面几个原因

        1、荧光值不高,比如没有起峰时纵坐标间距较小,一点点的波动就能反应出来,当起峰后,纵坐标比例显示的范围变大,所以会将本地压平。如果你荧光值不高时会出现锯齿状

        2、pcr仪器温度不稳定,或者没有稳压电源

        3、pcr反应管没有盖紧,反应液泄露

        4、pcr反应液有挂壁

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