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问
为什么 WB 有荧光,但曝光失败?
yunzhongmanbu555
我觉得很可能是显影液的问题。新鲜的显影液应该是淡黄透明,如果变成酱油色就尽量别用了。以前我就遇到过这种情况,一换显影液,马上就可以显出了。
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问
病理科的标本(肿瘤) 石蜡切片,可以做western blot吗?
zq2008fish
可以的,用过西安晶彩的石蜡组织蛋白提取试剂盒提蛋白,再按常规WB实验操作,做出来效果还不错。
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问
脱片产生的原因是什么?如何防止脱片?
口贝力15206
由于免疫组化过程长,组织切片长时间浸泡在缓冲液和试剂内经过多次冲洗浸泡和作用,尤其是在抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等因素的影响,极易造成脱片
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问
请教有关TSC2蛋白的转膜条件是什么?
天王盖地虎-0
Tuberin 我们也在做,或许可以把你的样本给我试试我手里的抗体
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问
有时片子上的组织有裂纹,是脱水时间太长的缘故吗?
akitten
有可能 也有可能是二甲苯透明时间过长 拿出后封片速度较慢 片子在空气中已干燥的话 就会容易有裂纹出来
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问
针对EV71的VP1的特异记忆性B细胞,对记忆B细胞进行单个细胞RT-PCR,如何设计引物呢?
yuandingli
你如何获得单个B细胞的?如果是血液来源的B细胞,还要筛选吧?如果是融合的细胞,用恒定区的引物就行了。
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问
贝类的血细胞能否直接用试剂盒?
苏格兰白草莓
申请个试用装试试就知道了,反正实验材料还是很好获得的吧
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问
IFN-γ 的 PCR 均不能扩出片段是为什么?
wangweishi_1986
如果引物设计的没问题的话,两个建议:1.降落PCR,2.先将引物对99℃10s,再放冰上,再加到PCR体系里,试一试
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1817 围观
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问
为什么要铺两层浓度不同的琼脂呢?
塞舌尔墨宝
底层浓度高提供营养同时防止细胞贴壁,上层浓度低有稀疏的孔径也可提供营养使肿瘤细胞形成细胞球,同时可加入其他药物或细胞因子设置不同对照,
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1296 围观
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问
水通道蛋白如何提取呢?
塞舌尔墨宝
提取总蛋白,上样检测,利用特异性抗体就可以把你需要观察的对象区别出来
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问
荧光免疫 PCR 用什么仪器获得不同颜色标记的结果?
苍狼-huahua
现在市场上的PCR仪器多种多样,各自采用获取荧光标记结果的方式大不相同。现在潮流方向是用荧光探针(带有标记基因的片段和荧光基团)参与聚合酶链反应,当荧光强度达到机器可以判读的阈值,系统的原始扩增曲线就会上扬。
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问
在什么情况下使用TritonX-100?
苹果嘿嘿
核染时使用
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问
苯胺黑染色的原理是什么,具体怎样操作?
wumh1989
可以看看细菌的带电性,苯胺黑染色是负性染色,负染后杆菌和球菌就很容易区分了(直接看细菌形态即可区分)。但这种染色对于较短的杆菌有时也不是那么容易与球菌区分的,就需要根据细菌特性进行相应的化学方法鉴别。PS:负染色法需要使用酸性染料来染色,如伊红或苯胺黑。因为细菌体表面带负电,而酸性染料的色原也带负电,所以色原只能将背景染色。没有染色的细菌在染色背景下就能很容易的观察到。(引自百度百科)
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问
为什么我跑出来的 PCR 条带在起跳前会有那么多小锯齿样波动,而人家的就是光滑的直线?
sayid
注意看你的荧光曲线图的纵坐标数值,是不是很低(正常几万到几十万,你的是不是只有几千或者更低)?是不是你的曲线最终达到平台期后的数值很低。你这种情况多数是因为模板含量低或引物扩增效率低,没有出现强扩增,信噪比太低,起跳前的背景信号被放大出现杂波。因为信噪比大,检测信号其实很不准确,两孔差异就大了。建议换模板或者换引物,或者看看有没有其他体系添加失误的问题。
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问
我觉得肿瘤淋巴结转移主要是细胞吞噬的结果(免疫细胞将肿瘤细胞带入淋巴结),如何实验呢?
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问
跑 PCR 时条带出来了,可 marker 没跑开是什么原因?
我是金博士
marker没跑开主要有这几个原因:marker上样量太多,胶的浓度问题,marker自身问题,跑胶时间不够。你可以换个marker或者减少上样量,多跑一下试试看。
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问
做完转化后培养的菌(DH5a)长不大是什么原因啊?
我是金博士
建议你重新做,可以用氯化钙法制备,转化效率不错的。去年2月份的能转化出来还是很奇迹的。一般感受态最多3个月,都不保险。你这样长出来的菌是不正常的,不用纠结了,不要,重新做。
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问
WB 定量测定光合酶 PEPCase,一抗怎么选择?
1852 围观
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问
为什么质粒DNA能在真核细胞里面表达?
3717 围观
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问
冻存组织如何解冻
fountain571
冻存的组织解冻后一般对微结构都有损伤 如果后期再固定做组化的话不好
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