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        为什么 WB 有荧光,但曝光失败?

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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        guanshuli

        加ECL后荧光很强,但是胶片上却没有曝出来,求解答
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        11 个回答

        user-title

        fountain571

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        曝光液及两者混合问题
        user-title

        enpinghuang

        有帮助
        1. 确定胶片没问题。2. 显影液、定影液没问题以及放入顺序。
        user-title

        abmicle

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        如果你是用老式的胶片曝光,那原因有两种:1 胶片被曝光了 2 背景太高,目的条带被掩盖
        user-title

        djzgood01

        有帮助
        1.首先看看你的胶片有没有曝光(拿张空白的直接扔到显影液中看看)。 2.滴加的2抗浓度会不会太高,荧光一会就猝灭(2抗浓度降低点) 3.夹PVDF膜的镊子是不是生锈?铁锈也会影响(换个塑料的) 4.最后就是你的显影液啦、(一般用一周左右,或者换用质量好的) 目前我们碰到的就这些问题,欢迎补充。。。
        user-title

        hgm100

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        显影液和定影液也有保质期?放错?再试一次?
        user-title

        wq701

        有帮助
        1,显影液是否使用过多,失效? 2,荧光太强,发生淬灭。 一般是2。因为显影液如果到一点都显不出来的话,肯定很混了,LZ应该注意到,不会用了。 2我遇到过几次。荧光很强,很快淬灭。
        user-title

        yunzhongmanbu555

        有帮助
        我觉得很可能是显影液的问题。新鲜的显影液应该是淡黄透明,如果变成酱油色就尽量别用了。以前我就遇到过这种情况,一换显影液,马上就可以显出了。
        user-title

        zq2008fish

        有帮助
        可能的原因有: 1.操作过程中荧光淬灭,如用镊子夹膜,包保鲜膜等。 2.没有有效显影:如放错显影液,片子从压片夹拿出来后在投入定影液之前这个过程中曝光了等。 3.荧光过强,酶消耗过快,还没来得及压片子,荧光已经衰竭了。
        user-title

        雷神妹妹

        有帮助
        恩,支持王老师的意见,而且显影液和定影液也有保质期哦,注意下。或者换用凝胶成像仪检测试试
        user-title

        yangweiwei

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        若显影定影没有问题的话,注意是不是用的保鲜膜有问题
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        王建勇

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        有没有注意曝光的时候是先放显影液,再放定影液,放错的话就会没有东西的出来的。
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