实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问转膜是电流异常升高是为什么？

无情伤流水

一般是配方问题电流过大转膜会出问题

3 回答2230 围观

问同一批MIX，同一条件，同一批PCR，同一块胶，同一电泳，为什么差别就这么大呢

wisdyadong

胶配的不均匀！

8 回答3468 围观

问wentern blot抗体孵育，PVDF膜上是否可以同时孵育不同种属来源的两种蛋白？

应用场景

即使是相同分子量蛋白，用li-cor odyssey的两个近红外荧光通道也可以同时孵育不同种属一抗，二抗，同时扫描曝光，类实验常见于磷酸化蛋白检测。

4 回答2051 围观

问做分子量270的蛋白电泳和转膜什么条件比较合适？

龟龟的花裤子

你好，我们跑的蛋白是220的跑不出来你的电泳和转膜的时间都是多少啊

2 回答2038 围观

问WB的内参一直做不齐是什么原因？

张振1986

你的这个问题是非常常见的，就算在实验室专业做WESTERN的人员，也会遇到内参不齐的问题。单独上样可以出现，可以排除蛋白本身的问题，但混合一起加时却跑的不齐，最大的可能就是胶的问题，胶配的不均匀导致蛋白跑的不在同一水平。在就是抗体孵育问题，不知你是用孵育盒，还是用封膜孵育，一定要保证膜与抗体充分接触，保证孵育效果。三是显影剂是预混还是混合好的，注意混合比例，祝楼主早日跑出理想的条带。

3 回答9463 围观

问IC50，药物作用时间为多久呢？

bluesky219

要看你想要多久的IC50了，一般细胞毒药物求IC50是48h或72h，其他药物可以更长时间

1 回答3399 围观

问蛋白分子量相近能跑两张膜吗？

应用场景

可以，跑两张膜，也可以考虑用一张膜两种荧光二抗检测。

1 回答1086 围观

问我用 SPF 鸡胚培养病毒，为什么结果老是分不出来？

览道

你是想分什么毒？这个很重要

2 回答3051 围观

问有那位高手跑过小鼠 IL-9 的定量 PCR，最近我在跑换了三个引物但仍然没跑出来该怎么办？

葫芦一笑

优化一下引物的温度或者条件，还有设计的引物要在保守区域

1 回答1676 围观

问在生物学实验中，Panels 具体是指的什么？

great0722

panel是把感兴趣的基因放在一起，通过检测这些基因，来了解某种疾病的基因变异情况。与一代测序，PCR等技术相比，panel一次检测的基因数目非常多，通量高，价格便宜。panel测序的实现，是把感兴趣的基因用探针捕获下来，然后进行高通量测序，并进行数据的分析和解读。

1 回答5862 围观

问酶切没有条带，怎么办

我是金博士

PCR产物有条带吗？酶切时间有可能太长了，可以试着短点。

1 回答1927 围观

问我做得是贴壁细胞，可以不用多聚甲醛固定吗？

rayh9

1.活细胞对各种大分子通透性都差，不固定的话，后面的实验无法进行。多聚甲醛固定是常规选择，2.可以BSA封闭3.尽量创造类似条件，减少液体挥发4.尽量吸干，滤纸就行了，枪头吸不干

1 回答6570 围观

问大鼠在体灌注需要的多聚甲醛剂量是多少？

YRJ1995

成年大鼠每只250mL，前200mL快，后50mL慢

1 回答3714 围观

问PCT 降钙素原检测为什么不选择用赛默飞 B.R.A.H.M.S？

李梦涛

因为PCT-Q是半定量的，线性很窄，不能满足临床需求。另，自动化程度很低，相比梅里埃和罗氏，需要操作人员花费更多的精力。

1 回答3531 围观

问请问用 6 孔板做划痕实验一般划几行？为什么要 marker 笔在底部画直线，会对拍照造成影响吗？

兵兵兵兵小

在底部画线是为了划痕时候能有一个大概得参考，拍照时候用酒精棉擦掉就好。

1 回答2729 围观

问神经肌肉接头部位运动终板的显色

3373 围观

问平板克隆检测放化疗敏感性

1638 围观

问WB内参总是跑不齐

应用场景

我可能您选用的内参表达不稳定，需要换内参，或用总蛋白做内参

1 回答4777 围观

问为什么 Odessy 扫描后发现有的地方有蛋白，有的就是空白一片？

应用场景

是不是有可能转膜出现了问题？

1 回答528 围观

问集落是检测什么的呢？检测细胞多少嘛？

风Free001

将血细胞置软琼脂培养基进行培养形成的细胞集落数。集落形成单位的数量即为干细胞数量的量，因此是一种判定造血干细胞等分化能力的试验。

1 回答1436 围观

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