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WB 敷牛奶需要多长时间?
wangyx520
一般采用 5% 牛奶封闭,可以 4° 封闭过夜,也可以室温封闭 1-2 小时。我都试过,没啥区别。
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问
荧光定量的 CT 值有正常范围吗?
张法丽
一般在15-35左右,如果数值再大,可能这个基因的拷贝数太低了,表达量太少
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问
溶解曲线代表什么意思?
alaling
熔解曲线(Dissociation curve):随温度升高DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。总的DNA双螺旋结构降解一半的温度称为熔解温度(Tm),不同序列的DNA,Tm值不同。DNA中G-C含量越高,Tm值越高,成正比关系(摘自搜搜百科)。白话说来就是因为其中有非特异产物,包含两种以上的DNA序列,所以才有两个峰。当然不排除极度偶然的情况:1.两个序列的熔解曲线一样2.没有目标产物,只有一种非
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问
细胞及组织标本的要求有什么?
鱼doctor
4%的多聚甲醛固定,不需要无菌,组织块大小最好是undefinedundefined0.15cm
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问
Chip 实验最后的 PCR 需要注意什么问题?
lh19840703
1. Chip 实验最后免疫沉淀后得到的模板用酚:氯仿或者PCR纯化试剂盒提取都行的,但浓度一般都不会太高,通常在十几到几十ng/uL之间,因为浓度太低,所以纯度(吸光值260:280)也不能准确地测取。最重要的是阳性对照要能在PCR后检查到明显的条带。2. PCR引物设计一般退火温度要相近,分别位于基因组上靶序列上下游各50~150bp左右,最好使靶序列位于PCR产物链的中间位置。正如上面这位同
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问
q-PCR有非特异性条带有没有办法在设计引物的时候提高特异性?
健坤免疫组化
现在常用的引物有染料法(sybr green 1)和探针法(taq man探针),taq man探针的特异性非常,但是价格要贵一些,而sybr green 1价格比较便宜,但是会有非特异性扩增,建议试试taq man探针,详细还可参考:http://www.biomart.cn/infosupply/27646868.htm
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问
TUNEL 法检测细胞凋亡可以直接在孔板上做吗?
fly620
做成细胞爬片后,染色,避光孵育会比较方便,六孔板中的细胞不能用油镜观察。
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问
WB 条带缺失?还是杂带多余?
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问
请问划痕实验应该何时加入药物处理条件?
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问
细胞培养为什么会出现黑胶虫(第一次遇到)?
1924 围观
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问
WB 条带白色,背景脏是怎么回事?
6003 围观
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问
能够扩出目的条带但是特别弱是为什么呀?
698 围观
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问
抗体选择问题
2351 围观
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问
大分子量蛋白该怎么跑呀
2976 围观
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问
转膜总是不成功,检测不出蛋白怎么办
1659 围观
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问
划痕实验需要划几条啊?
1470 围观
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问
动物实验 WB 标本数量如何选择?为什么?
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问
划痕实验
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问
大鼠注射STZ后为什么血糖反而比之前降低了?
lan_hf
说明造模没有成功。30mg/kg剂量不算大的,另外,造模与老鼠的状态,配置的试剂,注射的方式等等都有关。不成功也可以再次注射。
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问
PCR有产物但是电泳无结果是为什么?
alaling
1,marker和引物有条带,说明在跑胶的环节应该没什么问题 2.内参和目的条带均没有,说明很大可能是在跑PCR的环节出现问题,就是没有P出东西。应该在PCR的环节找问题 3.你说电泳无目的片段的条带,是指有其它非特异条带还是根本就没有条带?如果可以,放上图是最好的,大家都可以一目了然,比这里做排除法强的多
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