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        溶解曲线代表什么意思?

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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        胡萝卜_120

        溶解曲线代表什么意思,我做出来有的样品是双峰有的是单峰,是样品的问题还是引物的问题?请赐教,谢谢。
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        8 个回答

        user-title

        健坤免疫组化

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        溶解曲线就是为了区分样品是否有非特异性扩增和初始模板有无被污染的情况,如果出现单一峰且峰值在Tm值位置出现,这就证明没有非特异性扩增,且初始模板没有被污染;如果出现多个峰,估计是有非特异性扩增了或者初始模板被污染了。更多内容,请访问http://www.biomart.cn/infosupply/27646868.htm
        user-title

        胡萝卜_120

        有帮助
        我想请问一下离80多远就算远小于80 了?
        user-title

        200210lee

        有帮助
        看你的熔解曲线峰值在什么温度,如有一个峰值明显很低远小于80,可以考虑是有引物2聚体,可以进一步通过琼脂糖电泳确定,看是否有小于100的条带。如非二聚体,考虑引物是否有非特异产物,或者模板污染等问题。
        user-title

        月儿弯弯1007

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        ;溶解曲线是在PCR循环结束后DNA双链解链时形成的,溶解曲线的横坐标代表时间,峰的顶点是双链正好解链一半时的温度,如果扩增出来的DNA溶解曲线都在一个温度范围,证明产物特异性较好。正常情况下是单峰,如果出现双峰可能引物设计有问题。
        user-title

        苏格兰白草莓

        有帮助
        你做NTC没有呢?最好先看看NTC有没有出峰,再做初步的判断
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        yilunanxia

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        溶解曲线理论上是单峰的,出现双峰就有可能是非特异性扩增。一般都是引物或者体系的问题。
        user-title

        alaling

        有帮助
        熔解曲线(Dissociation curve):随温度升高DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。总的DNA双螺旋结构降解一半的温度称为熔解温度(Tm),不同序列的DNA,Tm值不同。DNA中G-C含量越高,Tm值越高,成正比关系(摘自搜搜百科)。白话说来就是因为其中有非特异产物,包含两种以上的DNA序列,所以才有两个峰。当然不排除极度偶然的情况:1.两个序列的熔解曲线一样2.没有目标产物,只有一种非特异产物……
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        smartest

        有帮助
        熔解曲线是为了验证扩增产物特异性的,要是熔解曲线是单峰说明产物只有一条,结果较好;要是双峰说明产物不特异,可能存在引物二聚体或非特异性扩增,有可能你的引物设计有问题。
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