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实验问答

23,958,051 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问ELISA实验原理及注意事项。

静心观照

ELISA是将抗原或抗体结合在固相载体表面，利用抗原抗体的特异性结合以及抗体或者抗原上标记的酶催化特定底物发生显色反应，实现目标物检测的免疫分析方法。类型直接法：将抗原按一定的比例稀释好包被到固相载体上，然后加入稀释好的特异性的酶标抗体，孵育后加入底物显色并判读结果。间接法：将已知抗原连接在固相载体上，待测抗体与抗原结合后再与酶标二抗结合，形成抗原一待测抗体-酶标二抗的复合物，复合物的形成量与待测

7 回答1368 围观

问小鼠肺泡灌洗液怎么取

huarenqiang5

抽取肺泡灌洗液时注射器进去后直接缓慢回抽即可，注射器不需要来回抽打灌洗液。目前比较常见的几种肺泡灌洗液抽取方法如下:1.方法一收集支气管肺泡灌洗液:先将气管远小端结，将静脉留置针插入气管，连接2mL注射器灌洗0.5mL，轻轻按摩肺组织收集灌洗液，重复3次。2.方法二收集肺泡灌洗液:先穿两根外科缝线于气管、食管之间，将静脉留置套管针插入气管，分别在套管进入气管处、套管远端处结扎紧，连接1mL注射器灌

8 回答8507 围观

问想问问大家出现这种条带的原因有哪些，想让它看起来均匀，而不是一边量多一边量少的情况。怎么改进？

静心观照

1、可能是SDS-PAGE胶中存在气泡或者某不溶性颗粒解决办法：配胶过程中要小心，使用无杂质的液体。配胶用的海绵垫，如果用了很久之后，会从下面往上面漏小气泡，当气泡足够小并且胶快凝固的时候，走到中间的小气泡就停留在胶内，并会影响到后面的跑胶。另外配胶用的水，SDS，Tris缓冲液要注意不要有杂质，需过滤后使用。2、置胶有问题解决办法：把胶配好，不合格的胶坚决不用。可能是胶没有配置好，胶凝固后不均一

3 回答633 围观

问数学统计法包括哪些？

小Q医僧

数学统计法有：计量资料的统计方法；计数资料的统计方法；等级资料的统计方法。1、分析计量资料的统计分析方法可分为参数检验法和非参数检验法。参数检验法主要为t检验和方差分析（ANOVA，即F检验）等，两组间均数比较时常用t检验和u检验，两组以上均数比较时常用方差分析；非参数检验法主要包括秩和检验等。2、计数资料的统计方法主要针对四格表和R×C表利用检验进行分析。3、等级资料（有序变量）是对性质和类别的

4 回答948 围观

问spss进行医学数据分析的优缺点

土井挞克树

我认为优点是功能强大，简便，缺点是缺少图片处理功能

5 回答1716 围观

问求问，外泌体悬液如何提取蛋白呢？

土井挞克树

差速离心法是根据不同蛋白质分子及囊泡、细胞及细胞碎片等在均匀悬液中沉降速度的差异,通过逐渐增加离心力或离心时间,分离沉淀或上清的方法来提取。一般先采用低速离心如1500×g离心10min去除细胞碎片和大分子蛋白质,再高速离心如100000×g离心2h得到目的微球,然后用0.22μm的滤膜去除凋亡小体、微泡等进一步纯化。

4 回答2386 围观

问用磁力搅拌器对药品乙醇回流的话，将圆底烧品里放入乙醇，然后将放有乙醇的圆底烧瓶放入磁力搅拌器中，磁力搅拌器里的液体可以放水嘛

土井挞克树

可以放水，有时候还需要利用水来降温

6 回答574 围观

问细胞培养技术的基本概念

土井挞克树

清洗时注意要用等渗液清洗，注意温柔冲洗。

4 回答473 围观

问请问酶切反应加酶未在冰上进行会使酶失活或者活性降低吗？

sswei

酶切反应时低于或高于最适温度，都会影响酶的活性，甚至使酶失活，所以酶切反应加酶未在冰上进行会使酶失活或者活性降低

3 回答1205 围观

问硝酸还原酶活性测定对照(空白)制作的具体步骤，需要加哪些东西？

此用户已注销

硝酸还原酶活力的测定1、试剂：（1）亚硝态氮标准溶液称取1 g分析纯NaNO2溶于无离子水并定容至1000mL，然后再吸取1mL定容至1000mL,即为1μg/mL亚硝态氮的标准液。（2）0.1mol/L pH 7.5的磷酸缓冲液称取30.0905 g Na2HPO4·12H2O与2.4965 g NaH2PO4·2H2O，加无离子水溶解后定容至1000mL。

3 回答1176 围观

问2811bp序列pcr扩不出来？

小小翻车鱼

关于您提到的2811 bp序列扩增不出的问题，以下是一些建议和方法，您可以尝试调整这些方面以提高扩增效率：1. 引物设计与优化：检查引物设计，确保引物长度、GC含量、特异性和引物间距离都合适。同时，确保引物没有形成二聚体。可以尝试重新设计引物，或采用软件如Primer3等进行引物优化。2. 模板量：增加模板DNA的量。较低的模板量可能导致扩增效率降低。尝试增加模板DNA至50-100 ng。3.

4 回答524 围观

问求助大家，我想用六孔板看脂肪细胞连续七天的增殖数量，我看文献里面推荐的是3000接种量，会不会太少了呀？

feixue7758527w

我觉得不是太少的，主要是看增殖速度，如果你的细胞太多，会影响最后结果，三千是比较合适的。

3 回答556 围观

问小鼠肺泡灌洗液用瑞士吉姆萨染色怎么染可以清晰分辨细胞类型，本人用了浸染和混合染胞核和胞质颜色都偏深，这可以怎么调整呢

此用户已注销

我之前做实验的时候是适当调整染色的量和时间，注意观察细胞的类型。

4 回答977 围观

问可以在同一个地方提DNA或者RNA与做qPCR吗？

skyye

这个影响不大吧？现在很多都用试剂盒提取RNA了，一般不会影响qPCR的，但如果用Trizol的话需要在通风橱，做qPCR的话就在实验台就行，注意无酶操作

6 回答592 围观

问把中药材用粉碎机打成粉末，如果粉末不过筛，就这样直接用乙醇回流提取，影响大吗？需要过筛再提取嘛

skyye

这个影响应该不大吧，当然也要看具体中药材。没过筛的话可能存在一些较大颗粒的杂质，可能会影响乙醇回流提取效率

4 回答828 围观

问在高效液相实验中，建立标准品线性关系考察，是为了得到供试品的浓度的嘛？

高山云初

当然，最后得出的就是供试品的浓度了！

4 回答664 围观

问请问软琼脂克隆形成实验

此用户已注销

仔细观察一下之前的细胞培养情况再作出判断。

5 回答673 围观

问细胞饥饿时间12小时还是24小时哇

loveliufudan

细胞饥饿时间会因细胞类型和实验目的而异。一般来说，常规的细胞饥饿时间为12至24小时，但也有研究表明某些细胞需要更长的饥饿时间才能观察到所需的效果。因此，建议您先在文献中查找相似实验条件下的饥饿时间，并据此选择适当的饥饿时间。如果您无法找到相似实验的文献，可以从12小时开始尝试，然后再逐步延长饥饿时间，以确定最适合您的实验条件的饥饿时间。同时，建议您在实验中根据细胞的生长情况和细胞死亡率进行监测，

8 回答9902 围观

问THP1细胞培养

不畏过去无谓将来

请问最后咋处理的，我也聚团还超级严重

3 回答395 围观

问mcao大鼠TTC染色面积主要在脑切片下部的疑问

土井挞克树

皮层梗死少说明皮层还有血供，血供没拴塞住。

3 回答894 围观

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