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问
想研究甲醛致白血病的机理,请问有哪些白血病的细胞株?
天一湖医者
白血病细胞株具体来说有八十多种。如:人红系白血病细胞 TF-1、人慢性髓系白血病细胞 K562、人急性混合型白血病细胞 HAL-01等等。
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问
在NCBI上检索RORγt的RNA编码,发现有isoformX1、2、3和4这四种型别?请问该怎么选?
bamboopiggy
选四个isoform都包含的片段来检测rna,除非你的组织中有多种isoform,你又要区分
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问
疫情期间,如何采购国外的产品
dxy_gwrp7ndq
可以在网站购买或通过外贸代理公司采购,各课题负责人及实验人员采购前填写《科研用进口试剂、仪器设备备案表》,交至所属实验室,实验室定期至医院感控办备案,医院将根据具体采购物品种类进行抽检。
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问
qRT-PCR结果如何用SPSS软件分析差异?
bamboopiggy
你只要把ct拿到按照deltadelta ct法的计算公式,得到基因的拷贝数,用excel也能算
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问
培养的细胞总是污染怎么办
未来9
细胞污染的主要原因包括:操作技术不严格、试剂质量不达标、大气中孢子计数增加、养箱或操作台使用和维护不当等。因此,在细胞培养过程中,操作者不仅要严格遵守标准的操作程序,同时还要特别注意新产品、新品牌、以及设备的清洁维护。同时,及时检测并鉴定细胞是否被污染同样至关重要。
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问
PPAR gamma主要在哪表达
未来9
在啮齿类动物中,PPARγ 主要在脂肪组织中表达,而在人体,除脂肪 组织外,在巨噬细胞以及其他脂肪贮存细胞,如肝、肾、肺及直肠中均有表达
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问
植物中看一个磷酸化酶对下游基因是稳定还是降解,如何看上样量是一样的
bamboopiggy
植物应该也有内参吧?只要内参齐就可以啊,然后看你目的蛋白改变的趋势
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问
RUNX2WB检测中实际检测条带与预测不符
bamboopiggy
看抗体说明书,好多蛋白都与预测位置有差异,先看说明书,不行跑全膜,只要有趋势就可以
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问
RUNX2和PGC1 alpha在WB检测中
bamboopiggy
1.确定蛋白没降解。2.找个阳参,确定抗体好使
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问
跑wb时候电压用多少v比较好 什么时候变
未来9
电压条件 我们经常用的浓缩时80V,分离时100V比较好,条带很平
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问
请问跑wb时候你们用PVDF膜还是NC膜 有什么区别
天一湖医者
硝酸纤维素(NC)膜与蛋白质之间靠疏水作用结合,无需预先活化,对蛋白质的活性影响小;非特异性本底显色浅;价格低廉,使用方便。但结合在NC 上的小分子蛋白质在洗涤时易丢失;NC韧性较差,易损坏。聚偏二氟乙烯(PVDF)膜与蛋白质亲和力高,用前需在甲醇中浸泡,以活化膜上的正电基团,使其更容易与带负电荷蛋白结合。根据被转移的蛋白分子量大小,选择不同孔径的NC膜。因为随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量蛋白
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问
WB条带形状是圆形不是条形怎么办
bamboopiggy
如果有趋势,可以直接用,没事,估计是你胶灌的不匀
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问
如何分离到纯的神经元细胞?
天一湖医者
实验材料 母鼠试剂、试剂盒 BSS仪器、耗材 无菌器械显微镜实验步骤 1. 杀死怀孕 18 天母鼠(常用过量 CO2 使其窒息),用无菌器械取出胚胎,放在无菌的培养皿中。 2. 取下胚胎的头,放在盛有 4 ml 不含 Ca2+ 和 Mg2+ 的平衡盐溶液(BSS)的培养皿中。 3. 从头颅骨上取下脑,放在 35 mm 培养皿中的 BSS 液滴上,培养皿中半装满 Paraplast(Sigm
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问
电转液需要加多少甲醇?
lijUn5895
标准的湿转缓冲液和电泳缓冲液一样,为不含SDS 的1X Tris-gly 缓冲液,加入甲醇至终浓度20%。如果转膜的蛋白分子量大于80kDa,则推荐加入SDS 使之终浓度为0.1%。
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问
为什么在做菌落PCR鉴定的时候阴性对照(模板为水)也能P出条带?
zj佐罗
可能存在污染的风险。建议重新做,排查是否是试剂问题还是水的问题。
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问
检测到的条带分子质量与预测的不符?有哪几种可能的原因
小米粒e
可能基因有污染可能是非特异性扩增,引物特异性不高,退火温度不理想都会这样。
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问
关于免疫印迹实验的相关问题
小米粒e
注意一下跑胶时候的电压以及时间,跑的时候经常看着点。转膜的时候记得缓冲液新配置
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问
WB目标带是空白,周围有背景
bamboopiggy
因为你蛋白浓度太高了,把发光试剂很快消耗光了,来不及拍照,可以试试降低蛋白浓度。
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问
我做coip实验用的是碧云天的兔IgG,效果不好。请问大家用的都是什么牌子的IgG啊?
小米粒e
我用的也是santa cruz。
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问
想问一下用Krytox和PFH材料制备纳米液滴,在透析除盐的时候为什么会出现沉淀呀?感觉是这些纳米液滴聚集在一起了。
lijUn5895
蛋白透析产生沉淀可能有以下原因:1.由高浓度的蛋白变性试剂(如8m尿素),到低浓度,再到不含变性剂的buffer,如果条件变化剧烈,使得蛋白不正确折叠而沉淀,这种情况比较常见。如果选择透析的方法,一定要多加几个中间浓度梯度,而且注意低温(4度),这有利于蛋白正确折叠。2.透析袋本身有一定的吸附,可以通过磁力搅拌来降低吸附。3.透析液PH靠近等电点,像catzp说的,换buffer。4.透析袋不干净
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