实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问请问用胰岛素体外刺激细胞之前都需要饥饿处理吗，为什么呢？感谢解惑

未来9

要的血清饥饿法培养主要有以下用途：(1)使细胞周期同步化。该方法可将细胞周期阻滞在G0/G1期，在此基础上进行的后继处理及细胞周期变化分析，结果更有说服力。这也是细胞饥饿法最主要和最常见的用途。在进行异种体细胞核移植重组胚胎前也要用该法使细胞处于休止的G0期。(2)无血清培养可使细胞处于饥饿状态，在加入药物后可更好的吸收药物，有助于药物作用的发挥。(3)血清可激活与细胞生长有关的信号通路（如MA

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问4T1细胞培养的观察

bamboopiggy

一般肿瘤细胞还是比较tough，比较好养的。你如果不确定形态，可以去atcc官网上看一下，或者维基百科也可以

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问细胞传代培养液中黑点问题？

dxy_gwrp7ndq

很可能是污染，如果污染的细胞数量不是很多，建议直接丢弃，或者重新复苏细胞进行培养。

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问MTT与CCK-8比较？

未来9

CCK-8法的优点：1、使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂；2、CCK-8法能快速检测；3、CCK-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度；4、CCK-8法的重复性优于MTT法；5、CCK-8法对细胞毒性小；6、CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。CCK-8法的缺点:1、与MTT法相比，CCK-8和XTT的价格比较贵。2、CCK-8试剂的颜色为淡

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问传代培养细胞死亡的问题？

dxy_gwrp7ndq

刚复苏的细胞一开始长得很好一传代就死，可能有以下四种原因：1，培养液有毒。2，PH有异常。3，细胞对添加剂较敏感。4，培养环境的影响。5，细胞染菌。

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问请问句子里面的（v/v）、（v/w）这些是什么意思啊？求尽量详细

bamboopiggy

w=weightv=volume，就是体积重量比，或体积体积比

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问抗炎药效学实验，提RNA

府宅

可能是RNA降解了，RNA变成单核苷酸了，就测不出

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问请问，在提取RNA ,跑琼脂糖凝胶电泳只能跑出两条带，反转录后最为模板影响定量的结果吗？

bamboopiggy

一般会看到28s和18s两条带。28s是18s的两倍就可以，一般5s是看不清楚的。所以继续往下做吧，没问题

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问银染致敏完直接显色了，显色了15分钟，还能重染吗

bamboopiggy

重新做吧，没法重新染，因为染色是a b液的反应，反应完了，就都结合了

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问HEK293瞬转表达抗体活性偏低

bamboopiggy

你收的太晚了，瞬转一般48-72h就到表达高峰了，你提早收试试

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问牛乳酸度的测定这个实验应该怎么做?

迟C迟

取一定量的牛奶，以酚酞作指示剂，再用一定浓度的碱液（通常用0.1毫摩尔/升的NaOH）滴定，根据消耗碱液的量，用T度（°T）表示酸度。实际测定时，可取100毫升牛奶（生产单位为了节省原料奶，也可取10毫升来滴定，这时需将碱液的消耗数乘以10），用酚酞作指示剂，以0.1摩尔的NaOH滴定，按所消耗的毫升数来表示，消耗1毫升为1°T。正常牛奶的酸度通常为16～18°T。滴定酸度受牛奶的稀释度和酸度影响

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问免疫共沉淀coip中的同型对照怎么选

洛噜啦噜啦嘞

免疫共沉淀coip中，建议以2a为主。

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问干细胞纯度用流式细胞仪怎么看

bamboopiggy

如果cd90和cd105双阳的。就是在右上象限，然后有个百分比的读值可以直接看出来

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问测空间沉降菌中平板菌落蔓延

天一湖医者

看下菌落轮廓，如果有明显界限，就分开计，没有的话算一个。

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问如何选择表达出蛋白的WB抗体？

科拜余萌

WB实验中使用到的有三种抗体：一抗、二抗和内参抗体。一抗是唯一针对目标抗原的抗体，可以进行制备也可以购买现货，难度系数较高；二抗直接买就OK，只是需要留意下种属选择；内参抗体必不可少，是WB实验中的质控环节。 WB检测之一抗一抗制备如果目的蛋白的现货抗体没有找到，或者都不中意，就需要亲自动手制备了，请公司帮你做也不错哦！自己制备一抗通常情况下可以选小鼠、兔制备多抗或者选小鼠制备单抗，前者省时省

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问可用于静电纺丝的材料筛选

小布丁瑶瑶

1聚氧化乙烯2 聚乙烯醇 3 聚乙烯吡咯烷酮 4 聚偏氟乙烯5 聚丙烯腈

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问如何提高抗体染色的特异性呢？延长封闭时间和二抗时间可行吗？

大草原的小灰驴

1.提高一抗的稀释倍数，降低第一抗体的浓度2.把多克隆抗体换成单克隆抗体3.缩短孵育的时间4.延长封闭的时间

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问噬盐菌光合磷酸化为什么不能代替复杂低效的光合磷酸化?

洛噜啦噜啦嘞

嗜盐菌紫膜的光合作用是迄今为止所发现的最简单的光合磷酸化反应嗜盐菌的菌视紫素和光介导 (Light-mediated)ATP 合成系统：在厌氧光照条件下培养嗜盐菌时,产生一种菌视紫素嵌入细胞质膜中,成为紫膜,使菌体呈现红紫色.紫膜的膜片约占全膜的50%,由 25%的脂类和75%的蛋白质组成.这种蛋白质与动物视觉器官的感光细胞中的视紫红质（rhodopsin）相似,也含有视紫素,被称为菌视紫素.嗜盐

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问肿瘤细胞的培养基必须要加双抗吗？

Topmicro

双抗并非必须的，但是你得保证环境和规范的无菌操作，而且涉及到某些会被抗生素影响的实验就必须不能加双抗。

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问细胞培养箱要如何清理消毒？

Topmicro

使用70％酒精或者洁尔灭全部擦拭一遍，开紫外灯照射即可，如果整个实验室环境太差需要熏蒸一遍。

5 回答2651 围观

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