THP1这种悬浮细胞如何进行基因敲除？如何挑单克隆？

THP1 最好用电转，用病毒都不一定能进去。敲完以后，你可以用流式做单细胞打板就可以

在显微镜下首先找到克隆，然后使用MARK笔画圈标记单克隆，4倍镜下于镜头和平台孔之见在皿底进行标记。标记成功后将克隆分离出来的方法有多种，（1）使用细胞刮轻轻刮下来（2）使用胰酶消化，这种方法需要严格控制胰酶的量，一般单个克隆3-4ul足够，将PBS充分吸干，直接加至克隆圈处，镜下观察细胞形态扁圆即可终止，直接将含单克隆细胞的培养基移到另一培养皿中培养即可。这种方法需要控制胰酶的量，避免扩散至周围克隆处，控制作用时间。