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问
有哪些多重免疫组化技术平台?哪个比较常用?
天一湖医者
上海阿克曼医学检验所(阿克曼病理)佰诺全景分析技术平台等
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问
使用caspase 3/7检测细胞凋亡,为什么正常培养的细胞,荧光值也非常常高?
bamboopiggy
因为细胞状态可能会有自发荧光,你设好对照组,圈门就可以
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问
慢病毒文库感染后,多长时间第一次收取细胞,作为基线?
bamboopiggy
一般感染起作用要48-72h,你可以48h收第一次
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问
远志对小鼠的化痰作用实验中,为什么要严格控制给药到处死小鼠然后插气管的时间呀?
天一湖医者
因为灌胃给药时间过长会出现死亡或者身体消瘦、精神萎靡等症状。
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问
CO—IP实验组背景脏,看不清条带,有什么优化办法么?
bamboopiggy
你的total input呢?是不是wb的抗体不好使,检测不到
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问
co—ip可以用beads+裂解液来做IgG么?
bamboopiggy
不能,igG是阴性对照,要排除抗体的重链轻链的影响。以及非特异性结合
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问
请问肿瘤悬浮细胞,最近开始变形长伪足,换了培养基跟血清,我怀疑gibco血清是假的,有所好转,培养基血清会导致细胞这样么?为什么
Eason老歌迷
换了培养基和血清,有所好转,那说明还是和这两个因素有关……
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问
怎么判断细胞是否染菌
未来9
只能根据经验去判断,细胞内出现小泡越来越多,细胞间有黑点布朗运动,细胞崩解,生长受限。
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问
MTT测药物对细胞的毒性,测的OD值必须在0-0.7范围内吗?
未来9
一般合适的OD值是在0.1-0.7之间,一般大于1可能就不会不准了
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问
固相免疫分析时,捕获蛋白的免疫分析的亲和力可以通过哪种方式增加,怎么增加实验中蛋白的结合率?
bamboopiggy
找到合适的ph值,找到合适的蛋白浓度,做好预实验,
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问
用放射性碘标记抗原,131和125I与化合物结合时怎么尽可能增加碘化效率,怎么增加被标记蛋白质的活性?
天一湖医者
第一,要尽量保持产物的天然结构,避免使用过于剧烈的手段纯化,如避免使用有机溶剂,SDS,尿素等使蛋白质变性的物质,尽量在低温下进行分离纯化,也要避免产生过多的泡末,避免过度搅拌。第二,要尽量提高其纯度。
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问
PANC-1细胞为什么看上去长不满
半糖奇朵
可以调整下培养基血清的配比,或者查一下权威文献中该细胞系的培养方法
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问
检测细胞凋亡时,PI染色法的染色剂制备过程是什么,与AO染色法相比有什么优点?
bamboopiggy
这两个方法都可以,看你们实验室有那种就用那种呗,一般用PI的多,是因为PI只能染死细胞,正常细胞不能着色吖啶橙(Acridine Orange,AO)为一种荧光染料,该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。其激发波长为488nm,吸收波长为515nm。它与细胞中DNA和RNA 结合量存在差别,复合物可发出不同颜色的荧光,红色荧光为AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为A
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问
0.5%CMC-Na配置
bamboopiggy
1.充分搅拌 2,不行滴几滴乙醇(最好不加) 3,用脱脂棉垫在布氏漏斗上,抽滤,封口冷藏保存。
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问
为什么bcl2和bax在wb和qpcr中结果都是同时增加的呀?
bamboopiggy
Bcl-2与Bax共属于一个家族,通过控制线粒体膜的通透性来调节凋亡激活物如细胞色素c的释放来影响细胞的状态。bax二聚体在膜上打开通道,增加通透性;bcl-2与bax形成异聚体,降低通透性。所以,bcl-2水平的升高和bax的降低表明细胞对凋亡的抵抗性增强,应该是保护药物起作用的标志;而反之则相反。现在你作出来的变化既然一致,那你可以试试计算bcl-2/bax的比值,比值越大,说明抗凋亡能力越强
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问
我想请问一下怎么找到我做的抗体有几种亚型呢?
BelleK1EH
1.建议从研究相关文献资料中寻找抗体亚型相关资料2.也可以去相关厂家网站寻找
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问
降低样本浓度为什么有助于提升得率?
天一湖医者
在达到平衡态的可逆反应中,增加一种反应物的浓度,化学平衡向正方向移动,所以提高另一种反应物的转化率,而自身,虽然转化的物质的量增多了,但加入的物质的量比转化的物质的量大,所以减小了
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问
人来源正常肝实质细胞
bamboopiggy
Hepatocytes are freshly isolated and cryopreserved on the same day. All cryoplateable hepatocyte characterization information can be found by viewing the characterization tables at www.bioreclamationi
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问
固相抗体是怎么形成的?
bamboopiggy
将抗体连接在固相载体上,形成固相抗体。其实就是按你抗体的载体是什么
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问
请问大神们,悬浮细胞,卵巢肿瘤的悬浮细胞,细胞以前偶尔会出现变形但很少,最近细胞变形很多,请问这种变形的原因是什么?怎样避免?
未来9
一般培养的悬浮细胞的确容易出现这个情况。1.从复苏细胞开始,要了解细胞的生长周期,尤其是出现指数生长期的时间段。尽量将细胞控制在一个合理的培养阶段,不要贪图省力贸然将细胞培养密度调小,或者认为过一个周末多个半天不处理也没有关系;除非你已经做过生长周期的确认;2.有些悬浮细胞在平面培养环境中,会贴服在培养表面,虽然不会像贴壁细胞一样,但也不容易飘起来,但是在不断传代中会出现贴壁越来越差的情况,这个时
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