实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问远志对小鼠的化痰作用实验中，为什么要严格控制给药到处死小鼠然后插气管的时间呀？

天一湖医者

因为灌胃给药时间过长会出现死亡或者身体消瘦、精神萎靡等症状。

2 回答386 围观

问co—ip可以用beads+裂解液来做IgG么？

bamboopiggy

不能，igG是阴性对照，要排除抗体的重链轻链的影响。以及非特异性结合

2 回答424 围观

问请问肿瘤悬浮细胞，最近开始变形长伪足，换了培养基跟血清，我怀疑gibco血清是假的，有所好转，培养基血清会导致细胞这样么？为什么

Eason老歌迷

换了培养基和血清，有所好转，那说明还是和这两个因素有关……

3 回答517 围观

问MTT测药物对细胞的毒性，测的OD值必须在0-0.7范围内吗？

未来9

一般合适的OD值是在0.1-0.7之间，一般大于1可能就不会不准了

4 回答2105 围观

问用放射性碘标记抗原，131和125I与化合物结合时怎么尽可能增加碘化效率，怎么增加被标记蛋白质的活性？

天一湖医者

第一，要尽量保持产物的天然结构，避免使用过于剧烈的手段纯化，如避免使用有机溶剂，SDS，尿素等使蛋白质变性的物质，尽量在低温下进行分离纯化，也要避免产生过多的泡末，避免过度搅拌。第二，要尽量提高其纯度。

2 回答424 围观

问请教一下这个免疫荧光图，这里的白色箭头指的是什么呢

bamboopiggy

你看figure legend，第一行的箭头代表 AQP5，第二行代表prospc，第三行代表 vWF 比较经典的位置。

1 回答304 围观

问检测细胞凋亡时，PI染色法的染色剂制备过程是什么，与AO染色法相比有什么优点？

bamboopiggy

这两个方法都可以，看你们实验室有那种就用那种呗，一般用PI的多，是因为PI只能染死细胞，正常细胞不能着色吖啶橙(Acridine Orange，AO)为一种荧光染料，该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。其激发波长为488nm，吸收波长为515nm。它与细胞中DNA和RNA 结合量存在差别,复合物可发出不同颜色的荧光，红色荧光为AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为A

3 回答1084 围观

问0.5%CMC-Na配置

bamboopiggy

1.充分搅拌 2，不行滴几滴乙醇（最好不加） 3，用脱脂棉垫在布氏漏斗上，抽滤，封口冷藏保存。

4 回答1164 围观

问为什么bcl2和bax在wb和qpcr中结果都是同时增加的呀？

bamboopiggy

Bcl-2与Bax共属于一个家族，通过控制线粒体膜的通透性来调节凋亡激活物如细胞色素c的释放来影响细胞的状态。bax二聚体在膜上打开通道，增加通透性；bcl－2与bax形成异聚体，降低通透性。所以，bcl－2水平的升高和bax的降低表明细胞对凋亡的抵抗性增强，应该是保护药物起作用的标志；而反之则相反。现在你作出来的变化既然一致，那你可以试试计算bcl－2/bax的比值，比值越大，说明抗凋亡能力越强

2 回答4903 围观

问我想请问一下怎么找到我做的抗体有几种亚型呢？

BelleK1EH

1.建议从研究相关文献资料中寻找抗体亚型相关资料2.也可以去相关厂家网站寻找

6 回答554 围观

问降低样本浓度为什么有助于提升得率？

天一湖医者

在达到平衡态的可逆反应中，增加一种反应物的浓度,化学平衡向正方向移动，所以提高另一种反应物的转化率，而自身，虽然转化的物质的量增多了，但加入的物质的量比转化的物质的量大，所以减小了

2 回答287 围观

问人来源正常肝实质细胞

bamboopiggy

Hepatocytes are freshly isolated and cryopreserved on the same day. All cryoplateable hepatocyte characterization information can be found by viewing the characterization tables at www.bioreclamationi

3 回答2114 围观

问固相抗体是怎么形成的?

bamboopiggy

将抗体连接在固相载体上,形成固相抗体。其实就是按你抗体的载体是什么

4 回答682 围观

问兔子角膜板层移植实验，术后测啥细胞因子或者白介素比较好？想看角膜愈合的情况和炎症指标

bamboopiggy

将相同大小的保留的角膜或巩膜移植物与10-0尼龙间断缝合线一起移植。在手术后3至21天对移植区进行照相记录，以评估上皮伤口愈合指数（％），新血管形成和细丝的存在。在第21天分析了移植区域CD3 + T细胞和CD34 +细胞的存在。

3 回答186 围观

问为什么要严格控制给药到小鼠死亡的时间？

bamboopiggy

不知道你的实验目的是什么，但是你控制好了小鼠死亡时间，可能直接在要死之前，取材啊。

3 回答417 围观

问elisa结合活性实验中酶标仪测出来的吸光度总是两边高中间低是什么原因呢？

bamboopiggy

首先确定酶标仪没有问题，其次看你操作过程中，是不是对中间冲的比较厉害？

3 回答432 围观

问我想知道免疫组化和ELisa 都可以测的一个指标，优先考虑哪个方法呢？

bamboopiggy

最好两种方法都做，互相验证，使结果更solid

3 回答339 围观

问请问大神们，悬浮细胞，卵巢肿瘤的悬浮细胞，细胞以前偶尔会出现变形但很少，最近细胞变形很多，请问这种变形的原因是什么？怎样避免？

未来9

一般培养的悬浮细胞的确容易出现这个情况。1.从复苏细胞开始，要了解细胞的生长周期，尤其是出现指数生长期的时间段。尽量将细胞控制在一个合理的培养阶段，不要贪图省力贸然将细胞培养密度调小，或者认为过一个周末多个半天不处理也没有关系；除非你已经做过生长周期的确认；2.有些悬浮细胞在平面培养环境中，会贴服在培养表面，虽然不会像贴壁细胞一样，但也不容易飘起来，但是在不断传代中会出现贴壁越来越差的情况，这个时

6 回答486 围观

问羊水细胞培养时，如何判断收获细胞的最佳时机？血性羊水如何处理？

科拜余萌

羊水细胞普通培养法1．一切操作均在严格无菌条件下进行，抽取羊水20～30ml，立即送往实验室。2．将穿刺所得羊水离心（1500r/min）5分钟，而后在接种箱内吸出上清液留其他检查用，将剩下的0.5ml沉淀在管底的羊水细胞轻轻打匀，分别接种在两个盛有培养液的无菌培养瓶内，充分混匀，放入37℃5%CO2培养箱。3．培养液有市售羊水培养液、张氏培养液或自制的F10培养液，L-谷氨酰胺，加小牛血清双抗，

5 回答1179 围观

问用胰蛋白酶分离皮肤后，从真皮层刮取表皮细胞时，角质形成细胞培养中有很多间质细胞，怎么去除污染？

Eason老歌迷

将皮肤活检材料置于聚维酮碘( Betadine）消毒液中30分钟，或者用适当加大浓度的青霉素和链霉素处理以防止污染。

3 回答514 围观

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