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细胞解冻的相关问题?

相关实验:冻存细胞的复苏

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心细北方

细胞解冻后附着力偏低,是解冻方法不对还是细胞的问题呢?

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6 个回答

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ZPODY

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推荐的解决方案:在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物,保存时间为1-5天,但这不是保存的首选方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养

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Guoood

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可能是细胞冻存的效果不佳,可以适当加多点血清冻存,或者用商品化的冻存液,还有长期保存要放在液氮,短期保存可以放-80,保存不好也会影响复苏效果。

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bamboopiggy

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细胞一定要速溶,然后9ml预热培养基中加入1ml的带细胞的冻存液,1000rpm离心10min,将沉淀重悬就可以,如果贴壁性不好,建议加点醋贴壁试剂

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一个小哭包

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除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外, 绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞), 在解冻之后, 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中,待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。

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天一湖医者

有帮助

主要是因为湿度过低致使培养容器上集聚静电所致。

可以通过适当增加房间湿度,使用防静电装置或者用消毒过的湿毛巾擦拭培养容器外侧,来减低静电产生。另外试剂混合不均匀,培养瓶转速等因素也可导致此现象发生。所以在进行细胞培养时,要确保细胞和所有试剂的溶液混合充分。在使用振荡培养箱进行细胞培养时,注意设置适宜的转速。

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未来9

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不是复苏的问题,是因为培养容器上的静电积聚导致的,去除静电增加湿度就可以解决。

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