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        关于细胞培养消化时间问题?

        user-title

        lyang556

        贴壁细胞培养总是把握不好消化时间,时间长了损伤细胞,时间短了消化不下来,应该如何把握时间?

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        7 个回答

        user-title

        ZPODY

        有帮助

        注意观察啊,肉眼都可以观察到的啊,大概到80%都detach的时候,加培养基终止消化,那样你就不会损失太多细胞,保证了大部分细胞都可以被吹打。

        user-title

        Guoood

        有帮助

        消化时间要根据每种细胞的特性去摸索一下。用原浓度的胰酶消化对细胞损伤大,建议将0.25%胰酶用灭菌的PBS稀释一半再去消化细胞,这样细胞不容易消化过,对细胞损伤小。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        加入胰酶后,在镜下观察,如果细胞开始变圆了,就立刻加培养基中止反应

        user-title

        dxy_elk098he

        有帮助

        消化中途可以多拿几次出来镜下观察状态,有大部分飘起来了就可以通过晃动摇下来剩下的。

        user-title

        心细北方

        有帮助

        消化时间和细胞类型、消化液的消化能力、细胞的密度等多种因素有关。一般养一种新的细胞要摸索一下消化时间,掌握细胞消化到什么程度恰到好处。消化的时间不能一概而伦,要看你的细胞的种类,即使同一种细胞,在不同的细胞株也回出现消化的时间不同的现象。

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        使用不同胰酶及其他试剂的消化时间相差较大,不强行要求消化时间,20s-10min均有,总体以细胞收缩相互分离并可以轻轻吹下为准终止消化。

        若无法准确掌控胰酶作用时间,建议按照下述操作:胰酶首先复温到室温后加入细胞,然后每隔20-30秒,即吹打下细胞,如果能够吹打散细胞,加入完全培养基终止消化,如果30秒吹打不下,再等30秒重复操作。

        user-title

        未来9

        有帮助

        消化时间: 其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可

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