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问
请问,提取的蛋白原液做完BCA放在4度冰箱过夜,忘记放在负20度了,还能用么,会不会谅解很多
迟C迟
问题不大,4度也不会降解这么快。长时间不用还是建议低温保存。
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问
移液枪里密封圈是什么材质的?
天一湖医者
NBR丁腈橡胶密封圈,HNBR氢化丁腈橡胶密封圈,SIL硅橡胶密封圈,
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问
请问用trizol提取的DNA可以用于表观修饰的实验吗?(如甲基化、CHIP等)
Guoood
可以使用传统trizol 法提取DNA进行甲基化等表观遗传实验,用试剂盒纯度和浓度反而不如trizol 法
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问
请问qpcr和pcr本质的区别是什么?怎样诊断呢?
迟C迟
qPCR是荧光定量PCR,相比普通PCR,会加入染料,便于收集荧光信号。结果可以得出相对/绝对 浓度等多组数据,然后根据你的目的,对实际数据进行分析。还能通过ntc的ct值判断实验合不合格。一般需要单独的仪器,像Roche 480。
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问
求大神指点HOK细胞怎么培养
天一湖医者
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃。细
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问
请问超声随机切断DNA为什么被淘汰了?有什么弊端吗?现在这个微球菌核酸酶又有什么优点呢?
Eason老歌迷
你都说了,超声是随机切断,那肯定,没有酶切法好。它一个随机切断,没有确定性,一个是酶切,有固定位点。
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问
请问我提了牙龈成纤维细胞原代,传代时候一直在培养基中加双抗,现实验需要去除双抗干扰,但是细胞一换成无双抗培养基就死怎么办?
bamboopiggy
是因为污染么?一停双抗细胞就污染了?你要去双抗的目的是什么呢?转染?其实现在好多转染试剂毒性没有那么大,不一定非要去除双抗。
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问
pcr产物进行琼脂糖凝胶电泳后可以不在凝胶成像仪紫外灯下切胶吗?
bamboopiggy
可以,你可以放个尺子,标记好位置,关了紫外切。
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问
Frank-starling机制在大鼠心肌上验证
bamboopiggy
这不就是生理上的异长调节么?Frank当时是在离体的蛙心上做的,你可以考虑做离体的大鼠心脏,然后改变灌流液中钙离子的浓度,来进行检测。
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问
在设计RCA环状模板时,模板长度在什么范围内合适
bamboopiggy
RCA的模板,不是取决于你实验的目的么?如果用phi29 DNA聚合酶可连续合成长达70kb的DNA片段。
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问
能否用本试剂盒提取酵母中的基因组DNA?
bamboopiggy
您所谓的本试剂盒,是哪个试剂盒啊?一般能提取细胞和组织的genomic DNA的试剂盒,可以用来提取酵母的genomic DNA
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问
提取的DNA中有RNA污染,为什么?
bamboopiggy
你提取DNA的buffer里面,第一步重选细胞的液体里面有没有加RNase?需要加RNase的
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问
提取的基因组DNA生物活性差,为什么?
bamboopiggy
你用基因组dna来做,可能量比较低,最好把你需要测活性的那个片段克隆出来做。
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问
质粒dna提取失败原因是什么
Keven轩
一般按照试剂盒来都没有问题,没提出来可能是质粒根本没转进去,或者操作问题
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问
麻烦各位老师帮忙看一下,这个36Kid出来是这样的,什么原因? 转膜时候时间到的时候中间拿出来时候膜上没有印到蛋白,出来就是这样
bamboopiggy
可能是你转膜的三明治夹心没有做好,膜和胶没有接触好。
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问
扩增得到的DNA条带弥散,是引物问题吗
Wuwuy
扩增得到的DNA条带弥散,是引物问题吗?考虑是不是跑完的胶在室温放了很久,或者4度过夜再拍的,一般这种情况拍下来是会弥散的。
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问
逆转录的CDNA要测浓度吗
bamboopiggy
一般没有人去测cDNA的浓度,因为你同一批rna调整浓度后,同一批次做的反转录认为反转效率是一致的,并且跑realtime以后,可以用内参来继续调整。
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问
用DH5a转化的时候除了42度热激1分钟,再一小时复苏是不是还有别的方法?
lzy必有我师
热激时间的确定与装感受态所用的离心管厚度有关系,所以你会看到不同的说明书上介绍的热激时间不一样,你可以自己做个梯度试一下,一般来讲30-90s之间都是可以的,当然转化率有些许的差异
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问
用cDNA扩增一个5000+bp的基因扩增不出来,实验室已有的各种酶都试了,另一个同时扩增的2000bp基因扩增出来了
Wuwuy
用cDNA扩增一个5000+bp的基因扩增不出来,实验室已有的各种酶都试了,另一个同时扩增的2000bp基因扩增出来了。5000直接扩太长了,也很容易出错,一般师兄师姐的做法是分成几段扩,并且测序检测是否有错
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问
鼠的nk细胞分离鉴定
Miracle星
小鼠外周血nk细胞分离液试剂盒,全血或者组织原浆都可以用。
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