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        逆转录的CDNA要测浓度吗

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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        dxy_nkqusvl2

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        4 个回答

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        bamboopiggy

        有帮助

        一般没有人去测cDNA的浓度,因为你同一批rna调整浓度后,同一批次做的反转录认为反转效率是一致的,并且跑realtime以后,可以用内参来继续调整。

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        迟C迟

        有帮助

        我们实验室不测,提完RNA测了浓度,根据最后要的cDNA的量稀释逆转录,默认逆转录完成之后cDNA就是已知的量。

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        天一湖医者

        有帮助

        般我们评估核酸模板的质量,需要从浓度、纯度及完整性三方面进行考量,但逆转录后的产物是一个混合体系,cDNA、未完全逆转录的RNA、dNTP、残余的引物以及各种蛋白和盐离子等成分,会干扰cDNA的吸光度,因此不建议用逆转录后的cDNA来检测浓度与纯度。

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        未来9

        有帮助

        需要。

        正规的实验流程是需要的,你是指逆转录过程中模板的浓度吧,比如mRNA,如果是这个,一般是需要的,因为你的逆转录试剂盒说明书一般给出的是模板的克数,在实际操作中估计一下就好,比如如果你的目标基因表达量低,你就多加一些,完全按说明书也可以。

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