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超滤后废液有目的蛋白
Eason老歌迷
要是没有特别的破损,你可以试一试清洗下。随着超滤过程的进行,在膜表面逐渐形成凝胶层,使透过通量下降,当通量达到某一最低数值时,就需要进行冲洗,这段时间成为运行周期。运行周期的变化与清洗情况有关。可以使用 0.1-0.5 M NAOH清洗。
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问
wb背景比较杂
Eason老歌迷
你这背景有点埋汰,脏,有小黑点。可能是封闭液的问题,封闭液是不是有小沉淀。是不是你洗膜没洗干净。
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问
WB显影
balalaLy
wb是一门玄学,做得越多越能碰上各种奇奇怪怪的情况。有些情况你也解释不清楚,重复做就是了,实在不行换个抗体,还不行,咱换人做。
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问
LC3B一条带不清晰。
balalaLy
电泳可以再往下跑,差不多把溴芬兰跑出去,转膜时间再延长一下。
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问
Southern Blot
天一湖医者
Southern杂交实验中,基因组酶切后跑电泳用的胶需为9.8cm×8.0cm 大小
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问
引物设计
天一湖医者
这个原因应该是发生了非特异性结合。
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问
杂交瘤融合率较低
Eason老歌迷
杂交瘤操作对于无菌要求特别高,你的操作的全部过程必须在严格无菌的条件下进行,不然它的融合率会降低很多。而且细胞融合是杂交瘤产生的中心环节,这一步关系到全部工作的成败。我可以给你一个小秘诀,就是我之前犯的错误,不能用含有蛋白的培养基配制PEG溶液。浓度低于30%的PEG融合成功率低,高于50%的PEG对细胞毒性大,然后细胞融合率上不去。
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问
原虫污染怎么办
Eason老歌迷
要么你就丢弃这些细胞和培养基,重新弄。要么你可以试一试用甲醛熏蒸。
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问
请问培养基里这层网状物是啥
超级无敌小仙女呀
从图片来看有些像细胞长时间没有传代造成的细胞老化,或许使用PBS清洗一下传代一下看是否还有。
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细胞技术与形态学板块
balalaLy
伊红很容易染,也很便宜,很可能是你用的伊红有问题,直接换吧
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问
orbit image analysis
Eason老歌迷
这个软件挺简单的,就是动态观察图像分析。我记得我当时学的时候就是查的一篇文献,那篇找不到了,你可以看看这篇新的:Orbit Image Analysis: An open-source whole slide image analysis tool
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问
小鼠连续腹腔注射用药三天,每次用药前都需要禁食吗?还是一直禁食?取材前12h禁食?
天一湖医者
连续腹腔注射用药三天,不需要每次用药前都需要禁食。
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小鼠皮肤石蜡切片制作,切片组织会碎什么原因
天一湖医者
那是因为内应力被彻底破坏导致 !
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问
他克莫司 T细胞激活
天一湖医者
可以,T细胞激活后他克莫司还可以发挥免疫抑制作用。
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问
求助!脑组织MDA检测经验
balalaLy
有可能是细胞破碎不好,或者组织量不够。有时候也可能大胆质疑一下试剂本身……
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问
FGF21配置
明明ov
谢谢回答,可是FGF21摩尔质量20800,我想着配成100uM稀释,但是只能配到12ul,还不够一次使用
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问
购买的原代细胞想自己鉴定,鉴定的时间是什么时候?复苏后吗?
balalaLy
起码得传个几瓶保种,不然鉴定完都没有细胞了不是白做了嘛
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问
各位老师,想请教一下病理组织切片脱水与浸蜡步骤的各溶剂时间怎样安排效果会好一些
Eason老歌迷
常用的脱水剂是乙醇,因为它价格便宜,易于得到。为了避免剧烈的扩散引起的组织的强烈收缩,脱水步骤应从低到高以一定的浓度梯度来进行,一般组织从50%乙醇开始,经过75%、80%、90%、95%、100%至完全脱水。脱水时间依据组织的类型和大小而定,一般各级乙醇中放置1到2h不等,如果中间须停顿,大部分材料停留在75%乙醇中,因为低浓度乙醇易使组织变软、解体,高浓度乙醇有脆化组织作用,放置时间不能过长。
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问
如何选择Rho的激动剂?
Eason老歌迷
我们实验室用nf—kb比较多,其实也都差不多。然后你可以根据自己想要做的实验,自由的选择,或者你可以去PubMed上找相关文献,然后查找一下它的方法,里面都有详细介绍。
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问
BEAS-2B和HBE细胞有什么区别?
秋秋欣欣
他们都是正常肺上皮细胞,HBE类细胞系为人支气管上皮细胞
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