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        镍柱纯化目标蛋白,杂蛋白分离不开

        相关实验:含有多聚组氨酸标签重组蛋白纯化实验

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        idiotOC0P

        为什么镍柱纯化组氨酸标签,总是在一开始就有峰(前五六管),第三四管是黄黄的,拿去做电泳也不纯,线性/梯度洗脱都用过。

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        4 个回答

        user-title

        秋秋欣欣

        有帮助

        可以使用咪唑梯度洗脱,杂蛋白说明纯化有问题

        user-title

        Eason老歌迷

        有帮助

        Ni柱的缺点就是特异性其实不强,样品里加40mM咪唑可以改善。

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        可以提高杂蛋白与镍柱结合起始咪唑浓度,以降低杂蛋白与镍柱的亲和力

        user-title

        天一湖医者

        有帮助

        有可能是非特异性结合。你可以尝试优化蛋白洗脱方法,将你的目的蛋白与杂蛋白进行分离。

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