科研问题请教

产品纯化后，任意一种酶都可以自动在后面加a

有加A反应液，连接前做个加A反应就可以了

是用普通Pcr 扩增的酶就可以实现在片段末端加A，而高保真酶往往两端不会加A，所以做TA克隆可以用普通Pcr 酶扩增片段即可，不用高保真。

只要你的延伸时间×酶扩增速度超过片段长度，扩出来的片段会自动加A的。如果不是连T载，也可以双酶切，这样片段加不加A也不影响你之后的步骤；或者使用现在的同源重组法，只要扩出来的片段有同源臂，也可以将片段克隆到载体上。