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请问各位大佬,做靶向代谢组学测短链脂肪酸,一组小鼠需要设置几个重复样本
Eason老歌迷
如果样品制备不是非常难,经费不是非常有限,我建议还是设置3个生物学重复吧。如果使用T检验,你应该设置尽可能多的生物学重复,建议至少3个重复。
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问
裸鼠身上起了一层白色的皮,是什么原因
天一湖医者
一是动物质量的问题,二是有感染某种菌,三可能是药物的作用。
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问
紧急求助大佬
Eason老歌迷
按照你的思路,自杀质粒应该携带目的片段降解了,但是事实是没有降解,那就说明这个降解通路收到抑制或者是压根就是没转染上。
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问
BMDC与OT-I 细胞共培养
Eason老歌迷
遇到过类似的情况,但是具体的药物不同,也是实际情况和预计情况有很大差别,这种情况建议你重新在做两次重复,看看是什么情况。
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问
4T1细胞出现凋亡残留的碎片,细胞变小,什么原因
天一湖医者
细胞状态好的时候生长特别旺盛,代谢很快,所以养这个细胞需要勤快,基本上每天都需要操作,一般是一天换液,第二天传代,在50%以上就可以传代了,1传3-4都可以,稍微长的太满达到80%以上,接下来传代后的状态就有影响。这个细胞很容易出现培养瓶边缘角落消化不完全出现累计的现象,这一部分出现凋亡会影响到整个培养瓶的细胞状态。
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问
模拟肿瘤微环境的刺激物
天一湖医者
可以,模拟肿瘤微环境可以用LPS来刺激。
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问
流式测细胞钙离子的问题
Eason老歌迷
流式细胞仪测定钙离子变化有一定的问题,例如在测定过程中可能会造成细胞的激活,而钙离子又是很容易激活的。另外测定的值是平均值。如果有条件,建议用confocal。
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问
急!!大鼠脑缺血再灌注Evans blue染色
Eason老歌迷
以前师兄做的时候,他是从颈静脉注射,几秒后钳夹心脏出来的大血管,迫使染料进入冠脉不出来,然后取标本,据说效果很好,还有人从颈动脉注射,也是钳夹主动脉迫使染料留在冠脉,你可以试试,或者调整一下方案
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新手小白在线求助!!!
Eason老歌迷
1慢病毒。例如人类免疫缺陷病毒(HIV)、猴免疫缺陷病毒(SIV)、马传染性贫血(EIA)、猫免疫缺陷病毒(FIV)都是慢病毒属,慢病毒属的原文是Lentivirus,其中Lenti-在拉丁文中有慢的意思。你如果想了解具体的慢病毒信息,你可以去购买的官网查一下,基本都有。2我简单介绍一下最经典的慢病毒吧,HIV-1病毒基因组是由两条正链的RNA组成,长度约为9Kb左右,两端是长末端重复序列(LTR
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问
镍离子柱填料保存问题
天一湖医者
镍柱填料在4℃冰箱里用20%乙醇可以长期保存。
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问
Zdock出现问题
Eason老歌迷
你先看下你的ZDOCK文件有没有可执行权限,如果有还执行不了,那你的zdock程序肯定不在你执行目录下,如果你不会调这个路径,可把zdock程序放到/usr/bin/目录下,然后执行的时候直接ZDOCK就好。
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问
实验设计
Eason老歌迷
你既然要看这两个蛋白表达对它的影响,你可以先跑wb看看正常表达情况,然后做设计引物,构建质粒,转染然后做pcr,可以分几组,一组空转,一组敲低,一组过表达,然后慢病毒转入细胞,然后做细胞实验看看细胞侵袭和迁移能力变化,然后做wb看看这几个细胞里的蛋白表达情况,这些差不多够你开了。
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问
CTll-2细胞培养
天一湖医者
1.CTLL-2细胞的培养:培养CTLL-2细胞的培养液是含有10%小牛血清和纯化IL-2(15~20IU/ml)或大鼠条件培养液(20%)的RPMI-1640培养液。一般在细胞培养瓶中接种2×104细胞/ml,在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养3天,细胞密度到达约2×105/ml时再稀释到2×104/ml,加入新鲜的IL-2或大鼠条件培养液继续培养。 2.大鼠条件培养液的制备
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问
求助!求助!
Eason老歌迷
我给你发我找的实验流程,我建议你配置硫酸钠稀释液浓度要合适,不然微嚢容易黏连。
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问
qpcr求助,溶解曲线双峰
yaonan120
这个基因做了第一次正式实验,发现80度那里提前出来一个峰,觉得是引物二聚体。条件不变,再做一次还是差不多这样。不知道这是不是真的就是引物二聚体还是其他原因?如果是应该改怎么改变反应条件才能不产生引物二聚体?反应体系如下:10ul体系 95度30秒 95度5秒 59度30秒 40个循环SYBR mix 5FP 0.4RP 0.4H20 3.2CDNA 1
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问
包涵体的溶解液,只用脲就可以了吗?有没有更具体的配方?
Eason老歌迷
可以直接用8M的脲或 6M胍融解,取上清,测浓度。直接稀释后包被检测相应抗体。
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问
怎么收集细胞上清进行酪蛋白ELISA检测?直接保留上清还是收集细胞后离心保留上清?
balalaLy
直接收集不同时间点的细胞上清,离心去除杂质
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问
细胞污染还是细胞碎片
橙子皮苹果
应该是你传的时候没有吹打开,细胞成团了
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问
求助:同一种细胞在不同的细胞培养板上进行培养,饥饿时间一样吗?
秋秋欣欣
其他条件都是一样的话,密度一样的话,饥饿时间应该差不多的
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人群PCR
Eason老歌迷
先均一化数据,去除误差,然后在计算
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